新規3細胞間タイト結合分子LSRの癌の診断・治療への応用

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K08350
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 小島 隆 札幌医科大学, 医学部, 教授 (30260764)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 幸野 貴之 札幌医科大学, 医学部, 講師 (10374563)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 子宮内膜癌 / 膵癌 / LSR / 悪性化 / adipokines

Outline of Annual Research Achievements

新規３細胞間タイト結合分子LSRを癌の診断・治療へ応用するために、膵癌および子宮内膜癌の遊走および浸潤におけるLSRの役割を解明した。
1. ヒト剖検材料を用いた前癌組織（PanIn、子宮内膜症）および癌組織（膵癌および子宮内膜癌）におけるLSR の発現および局在の変化を解析した。 ヒト剖検材料を用いた前癌組織（PanIn、子宮内膜症）および癌組織（膵癌および子宮内膜癌）におけるLSR の発現および局在の変化をみた。LSRは、それぞれの前癌組織から局在変化がみられ、癌の悪性度とともに発現は低下した。
２. LSRを高発現している癌細胞株を用いて、LSRの癌細胞の増殖、浸潤、遊走への関与を確認し、そのメカニズムの一部を解明した。　　LSR を高発現している癌細胞株（子宮内膜癌：Sawano細胞、膵癌：HPAC細胞）にLSRのsiRNAを処置してLSRの発現を低下させた結果、両癌細胞の増殖、浸潤、遊走の明らかな亢進が認められた。さらにDNAアレーを用いて、LSRの発現低下による遺伝子変化を検索した結果、癌細胞の増殖、浸潤、遊走に密接な関与が知られている増殖因子AREGおよび転写因子TEAD1の著しい亢進がみられた。
３．LSR を高発現している癌細胞株を用いて、adipokines (adiponectin、leptin)によるLSR の発現調節機構を解明した。　　脂質関連因子でもあるLSRのadipokinesによる発現調節を調べるために子宮内膜癌細胞にadiponectin、leptinを処置した結果、adiponectin処置でLSRの増加、leptin処置でLSRの低下がみられた。LeptinによりLSRが発現低下した癌細胞においては、増殖、浸潤、遊走の明らかな亢進が認められた。
以上の子宮内膜癌を用いたLSRの役割については、英文雑誌(Oncotarget)に掲載された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成27年度に実施する実験においては、ほぼ終了し有意義な結果を見出すことができた。

Strategy for Future Research Activity

１．ヒトのアレルギー性鼻炎および鼻茸で亢進のみられるヒストン脱アセチル化酵素に焦点を当て、その阻害剤によるtricellulinおよびLSRの発現・局在の変化を解析する。
２．3細胞間タイト結合分子tricellulinおよびLSR に直接および間接的に影響を与える分子を探索する。

Causes of Carryover

消耗品の使用が予定より小額であったため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

消耗品費（抗体、培養器具、蛋白およびRNA解析用試薬、形態観察用試薬、機能解析試薬など）：　157万円、旅費（国内学会）：　10万円、その他（材料費）：　5万円

Research Products

• [Journal Article] The roles of tricellular tight junction protein lipolysis-stimulated lipoprotein receptor in malignancy of human endometrial cancer cells. (2016)
  • Author(s): Shimada H, Satohisa S, Kohno T, Takahashi S, Hatakeyama T, Konno T, Tsujiwaki M, Saito T, Kojima T.
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 7 Pages: 27735-27752
  • DOI: 10.18632/oncotarget.8408.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Dysregulation of junctional adhesion molecule-A via p63/GATA-3 in head and neck squamous cell carcinoma. (2016)
  • Author(s): Kakuki T, Kurose M, TakanoK, Kondoh A, Obata K, Nomura K, Miyata R, Kaneko Y, Konno T, Takahashi S, Hatakeyama T, Kohno T, Himi T, Kojima T.
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 7 Pages: 33887-33900
  • DOI: 10. 18632/oncotarget.8432.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Interferon-gamma increased epithelial barrier function via upregulating claudin-7 expression in human submandibular gland duct epithelium. (2016)
  • Author(s): Abe A, Takano K, Kojima T, Nomura K, Kakuki T, Kaneko Y, Yamamoto M, Takahashi H, Himi T.
  • Journal Title: J Mol Histol Volume: 47 Pages: 353 -363
  • DOI: 10.1007/s10735-016-9667-2.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Downregulation of LSR promotes cell invasion via claudin-1-mediated MMPs in human endometrial cancer. (2016)
  • Author(s): Shimada H, Satohisa S, Kohno T, Konno T, Takano K, Takahashi S, Hatakeyama T, Arimoto C, Saito T, Kojima T.
  • Journal Title: Oncology Letters Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Claudin-4 binder C-CPE 194 enhances effects of anticancer agents on pancreatic cancer cell lines via a MAPK pathway. (2015)
  • Author(s): Kono T, Kondoh M, Kyuno D, Ito T, Kimura Y, Imamura M, Kohno T, Konno T, Furuhata T, Sawada N, Hirata K, Kojima T.
  • Journal Title: Pharmacl Res Perspect. Volume: 3 Pages: 該当なし
  • DOI: 10.1002/prp2.196
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Claudin-binder C-CPE mutants enhance permeability of insulin across human nasal epithelial cells. (2015)
  • Author(s): Kojima T, Kondoh M, Keira T, Takano KI, Kakuki T, Kaneko Y, Miyata R, Nomura K, Obata K, Kohno T, Konno T, Sawada N, Himi T.
  • Journal Title: Drug Deliv. Volume: 3 Pages: 1-8
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Poly(I:C) induced microRNA-146a regulates epithelial barrier and secretion of proinflammatory cytokines in human nasal epithelial cells. (2015)
  • Author(s): Miyata R, Kakuki T, Nomura K, Ohkuni T, Ogasawara N, Takano K, Konno T, Kohno T, Sawada N, Himi T, Kojima T.
  • Journal Title: Eur J Pharmacol. Volume: 761 Pages: 375-382
  • DOI: 10.1016/j.ejphar.2015.04.031
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Staurosporine induces formation of two types of extra-long cell protrusions: actin-based filaments and microtubule-based shafts. (2015)
  • Author(s): Kohno T, Ninomiya T, Kikuchi S, Konno T, Kojima T.
  • Journal Title: Mol Pharmacol. Volume: 87 Pages: 815-824
  • DOI: 10.1124/mol.114.096982
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Irsogladine maleate regulates gap junctional intercellular communication-dependent epithelial barrier in human nasal epithelial cells. (2015)
  • Author(s): Miyata R, Nomura K, Kakuki T, Takano K, Kohno T, Konno T, Sawada N, Himi T, Kojima T.
  • Journal Title: J Membr Biol. Volume: 248 Pages: 327-336
  • DOI: 10.1007/s00232-015-9774-0.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] c-Jun N-terminal kinase inhibitor SP600125 enhances barrier function and elongation of human pancreatic cancer cell line HPAC in a Ca-switch model. (2015)
  • Author(s): Konno T, Ninomiya T, Kohno T, Kikuchi S, Sawada N, Kojima T.
  • Journal Title: Histochem Cell Biol. Volume: 143 Pages: 471-479
  • DOI: 10.1007/s00418-014-1300-4.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Aberrant expression of claudin-4 and -7 in hepatocytes in the cirrhotic human liver. (2015)
  • Author(s): Tsujiwaki M, Murata M, Takasawa A, Hiratsuka Y, Fukuda R, Sugimoto K, Ono Y, Nojima M, Tanaka S, Hirata K, Kojima T, Sawada N.
  • Journal Title: Med Mol Morphol. Volume: 48 Pages: 33-43
  • DOI: 10.1007/s00795-014-0074-z.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] The role of lipolysis-stimulated lipoprotein receptor in malignancy of human endometrial cancer by obesity (2015)
  • Author(s): Takashi Kojima, Hiroshi Shimada, Seirou Satohisa, Takumi Konno, Syunta Takahashi, Tihiro Arimoto, Iori Nojima, Tsuyoshi Saitoh, Takayuki Kohno
  • Organizer: BMB 2015
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド（神戸市中央区）
  • Year and Date: 2015-12-01 – 2015-12-04
• [Presentation] 子宮内膜癌の悪性化における新規３細胞間タイト結合分子LSRの関与 (2015)
  • Author(s): 嶋田 浩志、郷久 晴朗、金野 匠、有元 千尋、高橋 俊太、畠山 翔翼、幸野 貴之、 齋藤 豪、小島 隆
  • Organizer: 第４７回日本臨床分子形態学会
  • Place of Presentation: 長崎大学医学部良順会館（長崎県長崎市）
  • Year and Date: 2015-09-18 – 2015-09-19
• [Presentation] 膵癌における３細胞間タイト結合分子LSRの役割 (2015)
  • Author(s): 有元千紘、河野剛、嶋田浩志、金野匠、畠山翔翼、高橋駿太、及能大輔、幸野貴之、小島隆
  • Organizer: 第４７回日本臨床分子形態学会
  • Place of Presentation: 長崎大学医学部良順会館（長崎県長崎市）
  • Year and Date: 2015-09-18 – 2015-09-18
• [Presentation] ヒト子宮内膜癌細胞の悪性化におけるlipolysis-stimulated lipoprotein receptorの役割 (2015)
  • Author(s): 嶋田浩志、郷久晴朗、金野匠、高橋俊太、畠山翔翼、齋藤豪、幸野貴之、小島隆
  • Organizer: 第６７回日本細胞生物学会
  • Place of Presentation: タワーホール船堀(東京都江戸川区)
  • Year and Date: 2015-06-30 – 2015-07-02
• [Presentation] 頭頸部扁平上皮癌におけるp63/GATA-3経路を介したタイト結合分子JAM-Aの発現調節機構 (2015)
  • Author(s): 角木拓也、黒瀬誠、高野賢一、近藤敦、小幡和史、野村一顕、宮田遼、金野匠、高橋俊太、畠山翔翼、幸野貴幸、氷見徹夫、小島隆
  • Organizer: 第６７回日本細胞生物学会
  • Place of Presentation: タワーホール船堀(東京都江戸川区)
  • Year and Date: 2015-06-30 – 2015-07-02