新規3細胞間タイト結合分子LSRの癌の診断・治療への応用

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K08350
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 小島 隆 札幌医科大学, 医学部, 教授 (30260764)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 幸野 貴之 札幌医科大学, 医学部, 講師 (10374563)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 子宮内膜癌 / 膵癌 / 頭頚部扁平上皮癌 / LSR / 悪性化 / Hippo pathway / TEAD1/AREG

Outline of Annual Research Achievements

新規３細胞間タイト結合分子LSRを癌の診断・治療へ応用するために、膵癌および子宮内膜癌の遊走および浸潤におけるLSRの役割を解明する。

１. LSR を高発現している子宮内膜癌を用いて、LSRの癌細胞の増殖、浸潤、遊走への関与のメカニズムを解明した。　LSR を高発現している子宮内膜癌において、昨年LSRが、増殖因子AREGおよび転写因子TEADを介して、子宮内膜癌細胞の遊走、浸潤、増殖に関与していることを報告した。今回は、そのメカニズムの詳細な解析を行い、Hippo pathway（YAP/AMOT/merin)が関与していることを見出した。
２．LSR を高発現している膵癌細胞株を用いて、LSRの癌細胞の増殖、浸潤、遊走への関与を解析した。　膵癌細胞株ではLSRは増殖因子EGF, TGF-β;処置により発現増加がみられ、siRNAによるLSRの発現低下により癌細胞の増殖、浸潤、遊走の明らかな亢進が認められた。この悪性化については、増殖因子であるAREGの亢進によるものと考えられた。LSR-ligandであるCDT処置により上皮バリア機能の低下とともに、軽度であるが癌細胞の浸潤の亢進がみられた。
３．LSRを高発現している頭頚部扁平上皮癌細胞を用いてLSRの役割を、子宮内膜癌および膵癌と比較検討した。　頭頚部扁平上皮癌細胞株および初代培養癌細胞において、LSRの発現低下により癌細胞の遊走および浸潤は亢進した。増殖には影響を与えなかった。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成2８年度に実施する実験においては、ほぼ終了し有意義な結果を見出すことができた。

Strategy for Future Research Activity

１．癌細胞において亢進しているヒストン脱アセチル化酵素に焦点を当て、その阻害剤によるLSRの発現・局在の変化を解析する。

２．肥満によるLSRを介した癌の悪性化への影響をみるために、糖代謝および脂質代謝に焦点を絞り解析していく。

３．最終年として、難治癌である子宮内膜癌および膵癌をLSRの調節の面から比較検討する。

Causes of Carryover

消耗品の使用が予定より小額であったため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

消耗品費（抗体、培養器具、蛋白およびRNA解析用試薬、形態観察用試薬、機能解析試薬など）：　135万円、旅費（国内学会）：　10万円、その他（材料費）：　5万円

Research Products

• [Journal Article] Loss of tricellular tight junction protein LSR promotes cell invasion and migration via upregulation of TEAD1/AREG in human endometrial cancer. (2017)
  • Author(s): Shimada H, Abe S, Kohno K, Satohisa S, Konno T, Takahashi S, Hatakeyama T, Arimoto C, Kakuki T, Kaneko Y, Takano K, Saito T, Kojima T.
  • Journal Title: Sci Rep. Volume: 7 Pages: 37049
  • DOI: 10.1038/srep37049
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The behavior and role of lipolysis-stimulated lipoprotein receptor, a component of tricellular tight junctions, in head and neck squamous cell carcinomas. (2016)
  • Author(s): Takano K, Kakuki T, Obata K, Nomura K, Miyata R, Kondo A, Kurose M, Kakiuch A, Kaneko Y, Kohno T, Himi T, Kojima T.
  • Journal Title: Anticancer Research Volume: 36 Pages: 5895-5904
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Behavior of Primary Cilia and Tricellular Tight Junction Proteins during Differentiation in Temperature-Sensitive Mouse Cochlear Precursor Hair Cells. (2016)
  • Author(s): Kakuki T, Kaneko Y, Takano K, Ninomiya T, Kohno T, Kojima T, Himi T.
  • Journal Title: Adv. Otorhinolaryngol. Volume: 77 Pages: 27-32
  • DOI: 10.1159/000441867.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Junctional Adhesion Molecule-A in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma. (2016)
  • Author(s): Kurose M, Kakuki T, Takano K, Kondo A, Obata K, Nomura K, Miyata R, Kaneko Y, Konno T, Kohno T, Kojima T, Himi T.
  • Journal Title: Adv. Otorhinolaryngol. Volume: 77 Pages: 92-97
  • DOI: 10.1159/000441881.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Clarithromycin prevents human respiratory syncytial virus-induced airway epithelial responses by modulating activation of interferon regulatory factor-3. (2016)
  • Author(s): Yamamoto K, Yamamoto S, Ogasawara N, Takano K, Shiraishi T, Sato T, Miyata R, Kakuki T, Kamekura R, Kojima T, Tsutsumi H, Himi T, Yokota S.
  • Journal Title: Pharmacol Res. Volume: 111 Pages: 804-814
  • DOI: 10.1016/j.phrs.2016.07 .033.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Mumps Virus Induces Protein-Kinase-R-Dependent Stress Granules, Partly Suppressing Type III Interferon Production. (2016)
  • Author(s): Hashimoto S, Yamamoto S, Ogasawara N, Sato T, Yamamoto K, Katoh H, Kubota T, Shiraishi T, Kojima T, Himi T, Tsutsumi H, Yokota S.
  • Journal Title: PLoS One. Volume: 11 Pages: －
  • DOI: 10.1371/journal.pone .0161793.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Nuclear localization of tricellulin promotes the oncogenic property of pancreatic cancer. (2016)
  • Author(s): Takasawa A, Murata M, Takasawa K, Ono Y, Osanai M, Tanaka S, Nojima M, Kono T, Hirata K, Kojima T, Sawada N.
  • Journal Title: Sci Rep. Volume: 6 Pages: －
  • DOI: 10.1038/srep33582.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Prolyl isomerase Pin1 promotes survival in EGFR-mutant lung adenocarcinoma cells with an epithelial-mesenchymal transition phenotype. (2016)
  • Author(s): Sakuma Y, Nishikiori H, Hirai S, Yamaguchi M, Yamada G, Watanabe A, Hasegawa T, KojimaT, Niki T, Takahashi H.
  • Journal Title: Lab Invest. Volume: 96 Pages: 391-398
  • DOI: 10.1038/labi nvest.2015.155.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] The roles of tricellular tight junction protein lipolysis-stimulated lipoprotein receptor in malignancy of human endometrial cancer cells. (2016)
  • Author(s): Shimada H, Satohisa S, Kohno T, Takahashi S, Hatakeyama T, Konno T, Tsujiwaki M, Saito T, Kojima T.
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 7 Pages: 27735-27752
  • DOI: 10.18632/oncotarget.8408.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Dysregulation of junctional adhesion molecule-A via p63/GATA-3 in head and neck squamous cell carcinoma. (2016)
  • Author(s): Kakuki T, Kurose M, TakanoK, Kondoh A, Obata K, Nomura K, Miyata R, Kaneko Y, Konno T, Takahashi S, Hatakeyama T, Kohno T, Himi T, Kojima T.
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 7 Pages: 33887-33900
  • DOI: 10. 18632/oncotarget.8432.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Interferon-gamma increased epithelial barrier function via upregulating claudin-7 expression in human submandibular gland duct epithelium. (2016)
  • Author(s): Abe A, Takano K, Kojima T, Nomura K, Kakuki T, Kaneko Y, Yamamoto M, Takahashi H, Himi T.
  • Journal Title: J Mol Histol Volume: 47 Pages: 353 -363
  • DOI: 10.1007/s10735-016-9667-2.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] LSR/YAP/AMOT/merlinによる子宮内膜癌の悪性化への関与 (2016)
  • Author(s): 嶋田浩志、郷久晴朗、金野匠、有元千尋、高橋俊太、畠山翔翼、幸野貴之、齋藤豪、小島隆
  • Organizer: 第４８回日本分子形態学学会
  • Place of Presentation: くまもと県民交流館パレア（熊本県・熊本市）
  • Year and Date: 2016-09-23 – 2016-09-24
• [Presentation] Dysregulation of junctional adhesion molecule-A via p63/GATA-3 in head and neck squamous cell carcinoma (2016)
  • Author(s): Yakuto Kaneko, Takuya Kakuki, Makoto Kurose, Ken-ichi Takano, Takayuki Kohno, Tetsuo Himi, Takashi Kojima
  • Organizer: Tight junctions and their proteins
  • Place of Presentation: ベルリン （ドイツ）
  • Year and Date: 2016-09-08 – 2016-09-10
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Claudin-4 expression via p63 in human normal epithelial cells and diseases (2016)
  • Author(s): Takashi Kojima Yakuto Kaneko, Takuya Kakuki, Terufumi Kubo, Ken-ichi Takano, Tetsuo Himi, Takayuki Kohno
  • Organizer: Tight junctions and their proteins
  • Place of Presentation: ベルリン （ドイツ）
  • Year and Date: 2016-09-08 – 2016-09-10
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] 子宮内膜癌の悪性化におけるASPP2の役割 (2016)
  • Author(s): 小島隆、嶋田浩志、郷久晴朗、金野匠、齋藤豪、幸野貴之
  • Organizer: 第１１４回北海道癌談話会
  • Place of Presentation: 札幌医科大学（北海道・札幌市）
  • Year and Date: 2016-09-03 – 2016-09-03