2017 Fiscal Year Annual Research Report
Identification and functional analysis of a novel IL-6/IL-12 family cytokine
| Project/Area Number |
15K08433
|
|---|
| Research Institution | Tokyo Medical University |
|---|
Principal Investigator |
徐 明利 東京医科大学, 医学部, 客員講師 (80597964)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
善本 隆之 東京医科大学, 医学部, 教授 (80202406)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
|
| Keywords | IL-27 / EBI3 / IL-23 / p19 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
(1) EBI3/p19-トランスジェニック（Tg）マウスを用いた生体内での役割とその作用機序：肝臓特異的なプロモーターを用いて発現量の異なるFLAGタグ付き一本鎖EBI3/p19を発現する2系統のTgマウスを作製した。発現量は、肝臓の細胞溶解液の抗FLAG抗体を用いたウエスタンブロット解析より、10倍ぐらい発現量の違いがあることがわかった。次に、コンカナバリンA投与で誘導される自己免疫性肝炎モデルを用いて、血中のトランスアミナーゼ（GOTとGPT）活性測定と肝臓の組織学的解析により肝傷害の程度を比較したところ、EBI3/p19の発現量依存的にGOT/GPT活性や炎症が軽減することがわかった。また、野生型マウスを卵白アルブミンで免疫しEBI3/p19の発現ベクターをHydrodynamic injection法により投与し、1週間後所属リンパ節を卵白アルブミンで再刺激すると、IL-17やGM-CSFなどのTh17サイトカインの産生が増強された。
(2) 機能的な組換え精製EBI3/p19蛋白質の作製：HEK293T細胞にFLAGタグ付きの一本鎖EBI3/p19発現ベクターを遺伝子導入し、その培養上清中を抗FLAG抗体カラムを用いて、組換え一本鎖EBI3/p19精製蛋白質を調製した。次に、EBI3/p19のレセプターとして想定されるgp130およびIL-23Raを強制発現したBa/F3細胞の増殖誘導能を調べたところ、IL-27およびIL-23では細胞増殖を誘導できたが、上述のEBI3/p19精製蛋白質では、細胞増殖を誘導できなかった。現在、さらに、レセプターが何か等について検討中である。
|
-
-
[Journal Article] Regulation of myelopoiesis by proinflammatory cytokines in infectious diseases.2018
Author(s)
Chiba Y, Mizoguchi I, Hasegawa H, Ohashi M, Orii N, Nagai T, Sugahara M, Miyamoto Y, Xu M, Owaki T, Yoshimoto T.
-
Journal Title
Cell. Mol. Life Sci.
Volume: 75(8)
Pages: 1363-1376
DOI
Peer Reviewed / Open Access
-
[Journal Article] Protective effects against tumors and infection by IL-27 through promotion of expansion and differentiation of hematopoietic stem cells into myeloid progenitors.2018
Author(s)
Orii N, Mizoguchi I, Chiba Y, Hasegawa H, Ohashi M, Xu M, Nagai T, Ochiai M, Mochizuki Y, Owaki T, Yoshimoto T.
-
Journal Title
Oncoimmunology
Volume: ー
Pages: ー
DOI
Peer Reviewed
-
-
[Presentation] A novel antitumor activity of IL-27 by promoting the differentiation of HSCs to antitumorigenic M1-like macrophages in tumor-bearing mice.2017
Author(s)
Chiba, Y., Ohashi, M., Hasegawa, H., Xu, M., Owaki, T., Mizoguchi, I., and Yoshimoto, T.
Organizer
The 2nd International Conference on Cytokine Signaling in Cancer
Int'l Joint Research
-
[Presentation] A novel role for Epstein-Barr virus-induced gene 3 to augment IL-23 receptor α protein expression through a lectin chaperone calnexin.2017
Author(s)
Mizoguchi, I., Ohashi, M., Hasegawa, H., Chiba, Y., Xu, M., and Yoshimoto, T.
Organizer
第46回日本免疫学会総会・学術集会
-
[Presentation] Prediction of chemical respiratory and contact sensitizers by OX40L expression in dendritic cells using a novel 3D co-culture system.2017
Author(s)
Ohashi, M., Mizoguchi, I., Chiba, Y., Hasegawa, H., Xu, M., and Yoshimoto, T.
Organizer
第46回日本免疫学会総会・学術集会
