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2016 Fiscal Year Annual Research Report

EHEC毒素が原因のHUSに対するヒト型モノクローナル毒素抗体治療薬の開発

Research Project

Project/Area Number 15K08478
Research InstitutionFujita Health University

Principal Investigator

辻 孝雄  藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (60171998)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2017-03-31
Keywords腸管出血性大腸菌(EHEC) / 致死毒素(Stx1と2) / 経鼻投与ワクチン / キメラ抗体 / HUS治療薬 / 毒素原性大腸菌 / 易熱性エンテロトキシン(LT)
Outline of Annual Research Achievements

毒素原性大腸菌のLTの変異毒素と腸管出血性大腸菌(EHEC)の致死毒素(Stx2)誘導体をマウス経鼻投与し、2種のStx2中和モノクローナル抗体(No 75D9,No45)を分離した(MI、71、2015)。各MAbの遺伝子配列の決定後、遺伝子組換え技術によりヒト-マウス型のキメラ抗体を作成した。
毒素とキメラ抗体の事前混合液を用い、Hela細胞によるin vitro中和実験を行った。その結果、No 75D9とNo 75D9キメラ抗体は、同程度にStx2を中和した。また、No45とNo45キメラ抗体も同様の結果が得られた。しかしNo75D9キメラ抗体の中和能力は、No45キメラ抗体より強力であった。また毒素とキメラ抗体混合液を、マウス腹腔内投与したin vivo中和実験を行った。その結果は、in vitro中和実験と同様の結果を得た。
さらに、毒素をマウスに事前ipし、キメラ抗体をivした。その結果、毒素ip後30分以上抗体ivが遅れた場合、抗体中和効果が半減した。この傾向は、No75D90およびNo45の元抗体及びキメラ抗体での同等に認められた。またキメラ抗体のマウス血中clearanceを検討した。その結果、元のMAbに比べ、キメラ抗体の血中clearanceは高かった。
以上の結果から、No75D9キメラ抗体は、No45キメラ抗体に比べ、中和能力が高く、臨床応用の可能性が高い。但し,マウスMAbに比べ、血中内安定度は低い。従って、抗生物質投与などで血中毒素濃度が急上昇する場合、抗生物質とキメラ抗体を同時ivする必要がある。

  • Research Products

    (8 results)

All 2017 2016

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] redominant prevalence of human rotaviruses with the G1P[8] and G8P[8] genotypes with a short RNA profile in 2013 and 2014 in Sukhothai and Phetchaboon provinces, Thailand.2017

    • Author(s)
      Guntapong R, Tacharoenmuang R, Singchai P, Upachai S, Sutthiwarakom K, Komoto S, Tsuji T, Tharmaphornpilas P, Yoshikawa T, Sangkitporn S, Taniguchi K.
    • Journal Title

      J Med Virol.

      Volume: 89 Pages: 615-620

    • DOI

      10.1002/jmv.24669.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Burden of rotavirus and enteric bacterial pathogens among children under five years old hospitalized with diarrhea in suburban and rural areas in Kenya.2017

    • Author(s)
      hah M, Odoyo E, Wandera E, Kathiiko C, Bundi M, Miringu G, Guyo S, Komoto S, Nyangao J, Karama M, Tsuji T, Taniguchi K, Morita K, Ichinose Y.
    • Journal Title

      Jpn J Infect Dis.

      Volume: 28 Pages: 28

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Immunochromatographic detection of the heat-labile enterotoxin of enterotoxigenic Escherichia coli with cross-detection of cholera toxin2017

    • Author(s)
      Arimitsu H, Sasaki K, Tsuji T.
    • Journal Title

      Journal of Microbiological Methods.

      Volume: 132 Pages: 148-152

    • DOI

      10.1016/j.mimet.2016.12.007.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Reassortment of human and animal rotavirus gene segments in emerging DS-1-like G1P[8] rotavirus strains.2016

    • Author(s)
      Komoto S, Tacharoenmuang R, Guntapong R, Ide T, Tsuji T, Yoshikawa T, Tharmaphornpilas P, Sangkitporn S, Taniguchi K.
    • Journal Title

      PLoS One.

      Volume: 11 Pages: e0148416

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0148416

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of a simple and rapid diagnosis method for swine edema disease to specifically detect Stx2e protein by immunochromatographic test.2016

    • Author(s)
      Arimitsu H, Sasaki K, Tsuji T
    • Journal Title

      Microbiol Immunol.

      Volume: 60 Pages: 334-42.

    • DOI

      10.1111/1348-0421.12379.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Bartonella henselaeに由来する新規血管新生因子の探索2017

    • Author(s)
      塚本 健太郎, 新澤 直明, 堀口 安彦, 辻 孝雄
    • Organizer
      第90回日本細菌学会総会.
    • Place of Presentation
      仙台市交際センター
    • Year and Date
      2017-03-19 – 2017-03-21
  • [Presentation] モノクローナル抗体を利用した豚浮腫病診断用のShiga toxin 2e (Stx2e)特異的イムノクロマトグラフィーの開発.2016

    • Author(s)
      有満秀幸、佐々木慶子、辻孝雄.
    • Organizer
      第159回日本獣医学会.
    • Place of Presentation
      日本大学生物資源科学部湘南キャンパス
    • Year and Date
      2016-09-06 – 2016-09-08
  • [Presentation] ボツリヌスC型神経毒素の細胞侵入経路と局在解析.2016

    • Author(s)
      塚本 健太郎, 幸田 知子, 辻 孝雄
    • Organizer
      63回トキシンシンポジウム
    • Place of Presentation
      山形県天童温泉
    • Year and Date
      2016-07-14 – 2016-07-16

URL: 

Published: 2018-01-16  

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