• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2018 Fiscal Year Research-status Report

病原細菌の菌体表層にみられるフィブロネクチン結合タンパク質群の病原的機能と構造

Research Project

Project/Area Number 15K08481
Research InstitutionOkayama University of Science

Principal Investigator

片山 誠一  岡山理科大学, 理学部, 教授 (70169473)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 櫃本 泰雄  岡山理科大学, 理学部, 教授 (90136333)
Project Period (FY) 2015-04-01 – 2020-03-31
KeywordsClostridium perfringens / fibronectin (Fn) / Fn-binding proteins / GAPDH / autolysin
Outline of Annual Research Achievements

ウェルシュ菌(Clostridiumu perfringens)はヒトにヒトにガス壊疽と食中毒を引き起こす偏性嫌気性グラム陽性細菌である。ヒトのフィブロネクチン(Fn)は、この細菌に結合する。我々は、この細菌のペプチドグリカン層にFn結合タンパク質FbpCとFbpDが存在することを明らかにした。今年度は、まずウェルシュ菌菌体へのFn結合をELISA法を用いて定量化した。この方法を用いてΔfbpC ΔfbpD株でのFn結合を調べたところ、Fn結合量の減少は認められなかった。次にΔfbpC株での結合をみるとFn結合量の減少が認められた。面白いことにΔfbpD株では、逆にFn結合量が増加した。相補実験では、わずかではあるが、FbpC、FbpD共にFn結合を高めることがわかった。以上のことから、FbpC, FbpDは、ウェルシュ菌のFn結合に主要な役割を果たしていないことが示唆された。
昨年、ウェルシュ菌の菌体表面にはGAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)がわずかながら存在し、ウェルシュ菌の菌体表層に存在する自己溶解酵素オートリシンと結合することが明らかになった。またGAPDHがFbp活性を有することが明らかになった。さらに最近、オートリシン自身にFn分子が結合することもわかった。そこで、キシロース誘導型プロモーターをウェルシュ菌のオートリシン遺伝子(acp)上流に挿入し、4%キシロース存在
下でacp遺伝子の発現を増加させたところ、その菌体へのFn結合量が増加した。よって、FbpC、オートリシンとオートリシンに結合したGAPDHがウェルシュ菌菌体へのFn結合の担い手であることが、明らかとなって来た。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

やっと、ウェルシュ菌菌体へのFn結合に関与するタンパク質の同定が進んだ段階だと言える。ここまで研究が進んだのは、一定の成果と考えている。しかし、これらのタンパク質が、ウェルシュ菌の病原性にどれほど貢献しているのか、動物培養細胞等を用いたin vivoの実験をしなければならないが、そこまで準備が進んでいない。以上のことから、やや遅れているとの判断を行った。

Strategy for Future Research Activity

オートリシン遺伝子の欠失株を作製し、オートリシンがウェルシュ菌のFn結合に関与することを明確にしたいと考えている。次にオートリシンは、既にその立体構造が決定されている。また、最近、ウェルシュ菌のGAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)の立体構造が決定された。これらの情報を元にオートリシンとGAPDHの結合の立体的モデリングを専門家に依頼して、両タンパク質の構造生物学的関係を明らかにしたい。

Causes of Carryover

今までの研究成果をまとめて2019年4月に開催される第92回日本細菌学会総会で発表する。それに科学研究費を用いるため。

  • Research Products

    (9 results)

All 2019 2018

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (8 results)

  • [Journal Article] Expression of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase on the surface of Clostridium perfringens cells.2018

    • Author(s)
      Matsunaga N, Shimizu H, Fujimoto K, Watanabe K, Yamasaki T, Hatano N, Tamai E, Katayama S, Hitsumoto Y.
    • Journal Title

      Anaerobe

      Volume: 51 Pages: 124-130

    • DOI

      10.1016/j.anaerobe.2018.05.001.

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] ウェルシュ菌の菌体表層に存在するフィブロネクチン結合タンパク質(FbpC, FboD)の機能解析2019

    • Author(s)
      河相朋美、松永 望、玉井栄治、成谷宏文、島本 整、櫃本泰雄、片山誠一
    • Organizer
      第29回生物試料分析科学会年次学術集会
  • [Presentation] Clostridium perfringens 菌体表層にあるFibronectin-binding proteinsの定量2019

    • Author(s)
      青野りよ、松永 望、片山誠一、櫃本泰雄
    • Organizer
      第29回生物試料分析科学会年次学術集会
  • [Presentation] ウェルシュ菌表層のFn結合タンパク質について2019

    • Author(s)
      藤本佳那子、松永 望、片山誠一、玉井栄治、櫃本泰雄
    • Organizer
      第29回生物試料分析科学会年次学術集会
  • [Presentation] Clostridium perfringens菌体表層のFibronectin (Fn)-binding proteins (Fbps)の定量2018

    • Author(s)
      青野りよ、松永 望、片山誠一、櫃本泰雄
    • Organizer
      第13回生物試料分析科学会中国四国支部学術集会
  • [Presentation] Clostridium perfringens由来オートリシンはgryceraldehyde-3-phosphate dehydrogenaseに結合する2018

    • Author(s)
      藤本佳那子、渡邉加奈子、松永 望、片山誠一、玉井栄治、櫃本泰雄
    • Organizer
      第13回生物試料分析科学会中国四国支部学術集会
  • [Presentation] ウェルシュ菌の溶菌酵素オートリシン遺伝子の欠損株作製の試み2018

    • Author(s)
      河相朋美、藤本佳那子、松永 望、成谷宏文、玉井栄治、櫃本泰雄、片山誠一
    • Organizer
      第13回生物試料分析科学会中国四国支部学術集会
  • [Presentation] ウェルシュ菌由来glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)はオートリシンのcatalytic domainに結合する2018

    • Author(s)
      藤本佳那子、松永 望、片山誠一、玉井栄治、櫃本泰雄
    • Organizer
      第71回日本細菌学会中国・四国支部総会
  • [Presentation] Clostridium perfringens 菌体表層にあるFibronectin (Fn) -binding proteins (Fbps) の定量2018

    • Author(s)
      青野りよ、松永 望、片山誠一、櫃本泰雄
    • Organizer
      第71回日本細菌学会中国・四国支部総会

URL: 

Published: 2019-12-27  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi