原発不明がんの治療成績向上を目的とした、がん組織由来マイクロRNAの網羅的解析

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K08640
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 大越 靖 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (10400673)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小島 寛 筑波大学, 医学医療系, 教授 (10225435) ; 島居 徹 筑波大学, 医学医療系, 教授 (80235613) ; 玉木 義雄 筑波大学, 医学医療系, 教授 (60188422) ; 沖 明典 筑波大学, 医学医療系, 教授 (60334067) ; 鈴木 久史 筑波大学, 医学医療系, 講師 (40750740)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 原発不明がん / マイクロRNA / 原発組織

Outline of Annual Research Achievements

「原発不明がん」は臨床的に注意深い全身検索や経過観察をおこなっても原発を同定できない転移性の腫瘍を指す。成人の全悪性固形腫瘍の 3～5％と、必ずしも稀ながんではなく、一方で原発巣が同定されないことにより、全身検索や治療方針に関して、医師及び患者双方に不安を与えやすいという問題を抱えている。原発不明がんには多種多様ながん腫が含まれており、そのうち特定の治療に反応し、長期生存が認められる一群が存在する。例えば、女性、腺がん、腋窩リンパ節の転移性病変のみの場合、実際に乳がんを発見できなくても、乳がんの治療を行うことで効果が得られるといった場合である。
がん細胞が由来する原発組織をできる限り同定し、個々のがんに応じた適正な治療につなげていくことが重要と言えるが、従来の免疫組織染色などに基づく原発組織推定では不十分な結論に終わることも多かった。このためがん組織からマイクロRNAを抽出し、その網羅的な発現解析を行うことで、原発組織を明らかにする手法の確立を試みた。広く一般に利用できるように、特殊な保存検体ではなく、通常のホルマリン固定パラフィン包埋組織からマイクロRNAを抽出し、解析する方法を選択した。
本年度は、乳がんや大腸がんなど、原発巣が明らかな検体に対し、すでに論文報告されている原発組織推定法を用いて検討した。結果、がん原発巣を検体として用いた場合、高い確率で推定された原発組織と一致した。一方、リンパ節など転移巣を用いた場合には、一致率が50%程度であった。
原発不明がんはリンパ節など転移巣しか分からないがんであるため、現在の推定精度では不十分であり、ほかの解析方法を検討し精度向上を目指している。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

ホルマリン固定パラフィン包埋組織からのマイクロRNA抽出、リアルタイムPCR法による網羅的な発現解析法が確立し、Rosenfeldらの方法（Nature Biotechnology,2008）を応用して原発組織の推定を行った。多数検体での解析の結果、さらなる精度向上が必要との結論に至った。十分な精度の推定法が確立したのちに、実際の原発不明がんを用いた解析が可能となる。

Strategy for Future Research Activity

すでに報告されている他の原発組織推定法を含めてさらに検討を重ね、組織推定のアルゴリズムを確立する。そして実際の原発不明がん組織において原発組織推定を行う。
まず過去に原発不明がんと診断された症例の検体を用いて、当時の臨床データや組織診断から推定された原発組織と、マイクロRNA解析によって推定された原発組織を比較し、後者の妥当性、有用性を評価する。最終的には網羅的マイクロRNA解析が、実際の診断ツールとして使用可能か検討し、臨床応用を目指す。

Causes of Carryover

本年度の研究を遂行するに必要な物品を安価に購入できたので、若干の差額が生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

来年度の研究を遂行するための物品費に充てる計画である。