大腸癌血管新生阻害薬の効果予測を可能にするバイオマーカーの網羅的探索

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K08963
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 小島 寛 筑波大学, 医学医療系, 教授 (10225435)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大越 靖 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (10400673)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 大腸癌 / Bevacizumab / 血管新生因子 / サイトカイン / microRNA

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、bebacizumab（以下Bmabと略）療法を受ける再発・難治大腸癌患者を対象とし、以下の４アスペクトから構成されている。１）Vebacizumab（以下Bmabと略）投与患者における血中Bmab-unconjugated free VEGFの測定、２）VEGFシグナルによって発現が亢進する血管内皮細胞特異的microRNA（以下miRNAと略）の解析、３）治療開始前の血中サイトカイン、血管新生因子の網羅的解析、4）VEGF以外の血管新生因子の同定。
これらの各アスペクトを遂行するために、研究初年度であるH27年度においては、①再発・難治大腸癌患者のBmab治療前後の血液検体、臨床データの収集、②VEGF等のサイトカイン、血管新生因子のアッセイ法の確立、③VEFG刺激によって発現量が変動するmiRNAの同定、を行った。以下、それぞれについて概略を述べる。
①再発・難治大腸癌患者のBmab治療前後の血液検体、臨床データの収集
再発・難治大腸癌患者でBmab投与を受ける症例を中心に、臨床データと治療前後（Bmab投与6Mまで）の血清サンプルを収集した。今日まで、約25例の症例の集積が終了した。これらのサンプルは上記のアスペクト１）３）４）において使用予定である。
②VEGF測定のためのELISAおよびサイトカイン、血管新生因子網羅的解析のためのBioPlexによるアッセイ系の確立が終了した。
③血管内皮細胞(HUVEC)をVEGF欠乏下でO/N培養した後にVEGFを加え、VEGFを添加する前後のHUVECを回収し、miRNAを精製した。これらmiRNAを網羅的に解析し、VEGF添加の前後で5倍以上の発現上昇または低下を来した12のmiRNAを見出した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究遂行上の障害はなく、予定どおりに研究は進んでいる。

Strategy for Future Research Activity

引き続きbebacizumab（以下Bmabと略）療法を受ける再発・難治大腸癌患者の血液サンプル、臨床データを集積する。これらのサンプルを材料として、以下の測定に着手する。
１．治療前後のサイトカイン、血管新生因子の網羅的測定
２．治療前後のVEGFおよびBmab-free VEGF血中濃度の測定
３．治療前後の候補miRNAの変動の測定