2015 Fiscal Year Research-status Report
HCVに対するカルニチンの抗ウイルス/抗脂肪化/抗酸化効果の基礎的・臨床的検討
Project/Area Number |
15K08980
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
小川 浩司 北海道大学, 大学病院, 助教 (20735188)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂本 直哉 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10334418)
須田 剛生 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任助教 (20447460)
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Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | HCV / カルニチン |
Outline of Annual Research Achievements |
HCV感染培養系を用いた、L-carnitine投与によるHCV複製能、粒子形成能への影響・IFN/DAAとの相加・相乗効果の検討
●申請者はL-carnitineは非構造遺伝子からのみなるHCVレプリコンシステムでは、増殖抑制効果を認めないが、一方でHCV感染増殖系(JFH-1株)では増殖抑制効果を認めた事を確認した。その増殖抑制機序としてはⅰ)粒子形成阻害、ⅱ)HCVのエントリー阻害、ⅲ)感染能の低いHCV粒子形成などが可能性として考えられた。そこで、HCVppを用いた検討を行い(HVCppのエントリーについてルシフェラーゼアッセイにて測定可能な系)、カルニチンが、エントリーを阻害しない事を明らかにした。また、oil red O染色や免疫染色によりカルニチン投与によりLipid dropletの形成が抑制される事を明らかにした。以上の結果より、カルニチンはHCVの複製やエントリーを阻害するのではなく粒子形成についての抑制効果がある事が推察された
●現在臨床上、問題となっているdaclatasvir やledipasvirといいたNS5A阻害剤に対する耐性となるNS5A Y93Hなどを有する薬剤耐性ウイルスを作成、培養細胞で感染増殖可能である事を確認した。更に、カルニチンは野生株のHCVと同様にNS5A Y93H耐性変異を有したHCVに対しても同様の抗ウイルス作用を認める事を明らかにした
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画していた、 1)カルニチンの抗ウイルス効果を有する機序の一部を明らかにする事が今年度出来た事、 2)DAA耐性ウイルスのin vitroでの作成に成功し、更に同ウイルスに対しても野生株と同様に抗ウイルス効果を有する事を明らかに出来たため
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Strategy for Future Research Activity |
●L-carnitineのHCV感染により惹起される肝脂肪化抑制効果に関与する脂質代謝関連分子の同定と解析 申請者は、L-carnitine投与によりHCV感染により惹起される肝脂肪化が改善される事を明らかにした。しかしながら詳細の機序は不明である。HCV感染により、脂質合成系の転写因子であるSREBP-1(sterol regulartory element-binding protein-1)の発現増加(Syed,2010 Trends Endocrinol Metab)、β酸化の律速酵素であるcarnitinepalmitoyltransferase I(CPT-I)の発現低下(Cheng, 2005 World J Gastroenterol)などが報告されており、HCV感染により脂質代謝関連因子の発現が撹乱される。L-carnitine投与によるHCV感染細胞内の脂質代謝、更に発癌と関連する因子の発現の変化を明らかにする目的で培養細胞、HCV感染細胞、HCV感染細胞+L-carnitine細胞を申請者の研究室で保有する次世代シークエンサー(ION PGM System, Life Technologies)を用いてRNA-sequencingを行い、L-carnitine 投与により変化する肝脂肪化、肝発癌と関連する因子の発現変化を明らかにする ●C型肝硬変患者に対するL-carnitine投与による抗HCV,抗酸化ストレス効果に関する多施設共同臨床試験 当施設を中心とした、臨床研究グループでC型肝硬変患者に対するL-carnitine投与がC型肝炎ウイルス感染に対する影響をウイルス学的・生化学的な検討を多施設共同の観察研究にて行う。カルニチン投与がHCV感染・肝機能・また尿中8 OHdGを測定する事によりHCV感染により惹起される酸化ストレスに対する影響を検討し臨床における有用性を検討する。
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Causes of Carryover |
C型肝硬変患者に対するカルニチン投与の臨床試験の患者エントリーが予定よりも遅れた為
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
カルニチン投与がHCV感染・肝機能・また尿中8 OHdGを測定する事によりHCV感染により惹起される酸化ストレスに対する影響を検討し臨床における有用性を検討する。尿中8 OHdGは、外注検査として行い、解析の委託費として使用する事を予定する。
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Research Products
(7 results)
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[Journal Article] ZEB1 expression is associated with prognosis of intrahepatic cholangiocarcinoma2016
Author(s)
Terashita K, Chuma M, Hatanaka Y, Hatanaka K, Mitsuhashi T, Yokoo H, Ohmura T, Ishizu H, Muraoka S, Nagasaka A, Tsuji T, Yamamoto Y, Kurauchi N, Shimoyama N, Toyoda H, Kumada T, Kaneoka Y, Maeda A, Ogawa K, Natsuizaka M, Kamachi H, Kakisaka T, Kamiyama T, Taketomi A, Matsuno Y, Sakamoto N
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Journal Title
J Clin Pathol
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Prevalence and characteristics of naturally occurring sofosbuvir resistance-associated variants in patients with hepatitis C virus genotype 1b infection2016
Author(s)
Ito J, Suda G, Yamamoto Y, Nagasaka A, Furuya K, Kumagai K, Kikuchi H, Miyagishima T, Kobayashi T, Kimura M, Yamasaki K, Umemura M, Izumi T, Tsunematsu S, Sato F, Tsukuda Y, Terashita K, Nakai M, Sho T, Natsuizaka M, Morikawa K, Ogawa K, Sakamoto
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Journal Title
Hepatol Res
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Efficacy and safety of daclatasvir and asunaprevir combination therapy in chronic hemodialysis patients with chronic hepatitis C.2016
Author(s)
Suda G, Kudo M, Nagasaka A, Furuya K, Yamamoto Y, Kobayashi T, Shinada K, Tateyama M, Konno J, Tsukuda Y, Yamasaki K, Kimura M, Umemura M, Izumi T, Tsunematsu S, Sato F, Terashita K, Nakai M, Horimoto H, Sho T, Natsuizaka M, Morikawa K, Ogawa K, Sakamoto N
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Journal Title
J Gastroenterol
Volume: in press
Pages: in press
Peer Reviewed
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[Journal Article] Serum granulysin levels as a predictor of serious telaprever-induced dermatological reactions2015
Author(s)
Suda G, Yamamoto Y, Nagasaka A, Furuya K, Kudo M, Chuganji Y, Tsukuda Y, Tsunematsu S, Sato F, Terashita K, Nakai M, Horimoto H, Sho T, Natsuizaka M, Ogawa K, Ohnishi S, Chuma M, Fujita Y, Abe R, Taniguchi M, Nakagawa M, Asahina Y, Sakamoto N
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Journal Title
Hepatol Res
Volume: 40
Pages: 837-45
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Intratumoral artery on contrast-enhanced computed tomography imaging: differentiating intrahepatic cholangiocarcinoma from poorly differentiated hepatocellular carcinoma2015
Author(s)
Tsunematsu S, Chuma M, Kamiyama T, Miyamoto N, Yabusaki S, Hatanaka K, Mitsuhashi T, Kamachi H, Yokoo H, Kakisaka T, Tsuruga Y, Orimo T, Wakayama K, Ito J, Sato F, Terashita K, Nakai M, Tsukuda Y, Sho T, Suda G, Morikawa K, Natsuizaka M, Nakanishi M, Ogawa K, Taketomi A, Matsuno Y, Sakamoto N
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Journal Title
Abdom Imaging
Volume: 40
Pages: 1492-9
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] A pivotal role of Kruppel-like factor 5 in regulation of cancer stem-like cells in hepatocellular carcinoma2015
Author(s)
Maehara O, Sato F, Natsuizaka M, Asano A, Kubota Y, Itoh J, Tsunematsu S, Terashita K, Tsukuda Y, Nakai M, Sho T, Suda G, Morikawa K, Ogawa K, Chuma M, Nakagawa K, Ohnishi S, Komatsu Y, Whelan KA, Nakagawa H, Takeda H, Sakamoto N
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Journal Title
Cancer Biol Ther
Volume: 16
Pages: 1492-9
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] 肝硬変患者に対するカルニチン製剤の有用性の検討2015
Author(s)
小川浩司,梅村真知子,出水孝章,伊藤淳,常松聖司,佐藤史幸,中井正人,荘拓也,須田剛生,森川賢一,坂本直哉.
Organizer
第117回日本消化器病学会北海道支部例会
Place of Presentation
札幌コンベンションセンター(北海道 札幌市)
Year and Date
2015-08-29 – 2015-08-29