2017 Fiscal Year Research-status Report
ＲＯＣＫ２によるポドサイト機能調節機構と糖尿病腎症への関与
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15K09277
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
宇都宮 一典 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (50185047)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
川浪 大治 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (50568889)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 糖尿病腎症 / ROCK2 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度はROCK2 flox/floxマウスの樹立に成功した。また、糖尿病腎症におけるROCK2の役割について、in vitroでの検討を進めた。メサンギウム細胞において、transforming growth factor (TGF)-βが細胞外基質の産生を亢進させることで、糸球体硬化を形成する。この過程におけるROCK2の役割について検討を行った。メサンギウム細胞（MES-13）をTGF-βで刺激したところ、Rho-kinaseの活性化とともにCTGFの発現が亢進したが、Rho-kinase阻害薬Y-27632はこれらの発現を抑制した。さらに、Y-27632がTGF-β刺激に伴うNF-kBの核内移行を抑制することをWestern blotおよび免疫染色で確認した。Rho-kinaseはアクチン骨格の再構築を制御するが、この点に着目しNF-kB核内移行における役割について検討を進めた。siRNAを用いてROCK1、ROCK2をそれぞれノックダウンしたところ、ROCK2をノックダウンした場合にのみCTGFの発現が抑制された。近年、ROCK2特異的阻害薬としてSLx-2119が開発されている。我々はメサンギウム細胞において、ROCK2阻害薬SLx-2119はNF-kBの核内移行を抑制することをWestern blotおよび免疫染色で確認した。以上の結果から、Rho-kinaseはアクチン動態を介したNF-kBの核内移行によってCTGFの発現を制御することが明らかになった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
遺伝子改変マウスの作製が当初より遅れているため
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度の研究で得られたROCK2flox/floxマウスをpodocin-Creと交配させて、ポドサイト徳的なROCK2欠損マウスの作製を進める。このマウスを用いて糖尿病モデルを作製し、ポドサイト機能に与える影響について解析を行う。また、メサンギウム細胞で確認されたROCK2による細胞外基質産生の制御機構がポドサイトにも存在するのか、in vitroでの検討も行う。
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| Causes of Carryover |
in vivoの研究計画を遂行すべく、ROCK2flox/floxマウスを得るための交配に多くの時間を費やした。そのため、予定していたin vivoでの実験を実施できなかったことが要因である。今後、臓器特異的なCreマウスとの交配を進め、糖尿病モデルを用いた検討を行う予定である。
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Research Products
(8 results)
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[Journal Article] Primary Aldosteronism With Type 2 Diabetes Mellitus Requires More Antihypertensive Drugs for Blood Pressure Control: A Retrospective Observational Study.2018
Author(s)
Ohashi K, Hayashi T, Watanabe Y, Hara K, Ukichi R, Asano H, Suzuki H, Yamashiro K, Tojo K, Sakamoto M, Utsunomiya K.
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Journal Title
J Clin Med Res
Volume: 10
Pages: 56-62
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] High Glucose Stimulates Mineralocorticoid Receptor Transcriptional Activity Through the Protein Kinase C β Signaling.2017
Author(s)
Hayashi T, Shibata H, Kurihara I, Yokota K, Mitsuishi Y, Ohashi K, Murai-Takeda A, Jo R, Ohyama T, Sakamoto M, Tojo K, Tajima N, Utsunomiya K, Itoh H.
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Journal Title
Int Heart J
Volume: 58
Pages: 794-802
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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