2017 Fiscal Year Annual Research Report
Identification of neurotoxic alpha-synuclein oligomers in Parkinson's disease and its application to molecular targeted therapy
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15K09322
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
徳田 隆彦 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80242692)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
建部 陽嗣 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (00637027)
渡邊 義久 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50363990)
笠井 高士 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (70516062)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | α-シヌクレイン / オリゴマー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
パーキンソン病(PD)の発症・進展の分子基盤として、細胞外に分泌されたα-シヌクレイン(A-syn)のオリゴマーが重要である。しかし、ヒトの血液・髄液でA-synオリゴマーがどのような分子形態で存在するかは明らかにではない。H28年度までの検討では、PDではない対照患者(正常圧水頭症)の血漿中のA-syn分子(オリゴマーを含む)について、自らが開発したA-syn特異的ELISAで検討し、A-synは主として60kDa(monomer)と約2000kDaに相当する画分に検出された。約2000kDaの画分は、想定されていたエクソソームが存在する画分よりも分子量の小さい画分であった。さらに我々は、A-synおよびそのオリゴマーと脂質画分とのassociationを検討した。脂質画分の調整には、ゲルろ過クロマトグラフィーを用いた。分取した脂質画分の抗A-syn抗体による免疫沈降とWBによる検討では、A-synは血漿中では主としてLDL,HDLと共存していることが明らかになった。H29年度は、さらにより簡便に脂質結合型A-synを抽出・検証する手法として、脂質分子を血漿から吸着する特殊なカラムを用いて血漿から脂質を分離し、脂質成分からA-synを検証する方法を開発した。この方法では、脂質分子とassociateしているA-synは主としてHDL領域に存在しており、ApoA1、ApoE、ApoJと同じ画分に存在した。またWBでは脂質結合型A-syn分子は単量体が主体であったが、一部高分子領域にもバンドが認められた。さらに、H29年度はPD患者の血漿から神経細胞由来エクソソームを分離精製する方法を開発した。少数例の検討によるPreliminaryな結果ではあるが、PD患者血漿中に存在する神経細胞由来エクソソームには、我々の高感度ELISAを用いることによって、A-synおよびそのオリゴマーが存在していることが明らかになった。
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Research Products
(19 results)
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[Presentation] Early-onset parkinsonism in a pedigree with phosphoglycerate kinase deficiency and a heterozygous carrier: Do PGK-1 mutations contribute to vulnerability to parkinsonism?2017
Author(s)
Kasai T, Sakaue S, Mizuta I, Suematsu M, Osone S, Azuma Y, Imamura T, Tokuda T, Kanno H, El-Agnaf O, Morimoto M, Nakagawa M, Hosoi H, Mizuno T
Organizer
The 23rd World Congress of Neurology 2017
Int'l Joint Research
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