2015 Fiscal Year Research-status Report
網羅的抗体解析を用いた劇症１型糖尿病早期診断のための特異的血清マーカーの開発
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15K09402
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
花房 俊昭 大阪医科大学, 医学部, 教授 (60164886)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐野 寛行 大阪医科大学, 医学部, 助教 (20556435)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 劇症1型糖尿病 / Seromic analysis / 新規抗体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今回、私共は劇症1型糖尿病の特異的診断マーカーの作成を目的とし、3名の劇症1型糖尿病患者血清 (急性期と亜急性期)を用いて約9000種類以上のSeromic analysisを行い、急性期血清において上昇を認めた9つの抗体を明らかにした。この9つの抗体から、前述した劇症1型糖尿病の発症機構に強く関与する“免疫応答”、“マクロファージ”、“炎症”をKeywordとし、抗X抗体(特許申請中)と抗Y抗体の2つの抗体に着目した。抗X抗体に関しては、抗X抗体価測定用ELISAキットを作成し、劇症1型糖尿病患者の急性期(発症後2週間以内)30名、亜急性期(発症後2週間から2ヶ月)30名、慢性期(発症後1年以上)14名、自己免疫性1型糖尿病患者30名、2型糖尿病患者30名、自己免疫性甲状腺疾患患者20名、健常者31名を対象とし、抗X抗体価・Y抗体価の測定をし終えた。その結果、抗X抗体価は劇症1型糖尿病急性期において、劇症1型糖尿病慢性期、他の疾患(自己免疫性1型糖尿病、2型糖尿病、自己免疫性甲状腺疾患)、健常者と比較して有意に高値を示した(各P<0.05)。また、同一患者において、劇症1型糖尿病急性期の抗X抗体価は、亜急性期と比較して有意に高値を示した(P<0.05, paired-t test)。また、抗Y抗体価は、自己免疫性1型糖尿病患者において、2型糖尿病、自己免疫性甲状腺疾患、健常者と比較して有意に高値を示した(各P<0.05)。
現在、ELISA法にて測定した抗X抗体価の特異性検討をおこなっている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
大部分が当初の計画通り進行しているため。
抗X抗体の特異性の検討に関しては、ウエスタンブロットによる確認が困難であり他の方法により検討中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
1) 抗X抗体の特異性の検討
HEK293細胞に蛋白Xを強制発現させ、劇症1型糖尿病患者急性期の血清を添加し、フローサイトメトリーにてX陽性HEK293細胞を確認する。
また、
2) 劇症1型糖尿病患者剖検膵組織での抗原蛋白X発現の検討
3) 抗X抗体/抗原蛋白Xの機能解析 を当初の計画通り遂行する。
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