2015 Fiscal Year Research-status Report
新規視床下部ホルモンによる新たなストレス応答機構の解明
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15K09419
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
蔭山 和則 弘前大学, 医学部附属病院, 講師 (30343023)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | ストレス / 視床下部 / QRFP |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Corticotropin-releasing factor (CRF) は、ストレス反応における視床下部―下垂体―副腎 (HPA) 系賦活化の主要な因子である。Kisspeptin は、leptinの代謝やエネルギー消費作用を仲介しているとされる。近年発見されたpyroglutamylated RFamide peptide (QRFP)は、代謝や摂食行動に重要なホルモンとされる。QRFP受容体であるGPR103は、ストレス応答の中心である視床下部室傍核（PVN）での発現が報告され、ストレス反応への関与が示唆される。本研究では、視床下部4B細胞を用いて、kisspeptin及びQRFPによるCRF遺伝子発現調節機序について検討した。
視床下部4B細胞において、kisspeptin受容体 (Gpr54)とQRFP受容体 (Gpr103) mRNAの発現を確認した。100 nM kisspeptin添加により、CRF mRNA及びarginine vasopressin (AVP) mRNAはそれぞれ有意に増加した。100 nM QRFP添加により、CRF mRNA及び転写活性はそれぞれ24 hと6 hで有意に増加した。QRFPによるCRF転写活性の増加は、protein kinase A (PKA) 及びprotein kinase C (PKC) 阻害剤の前投与により抑制された。QRFP添加によりp-CREBが増加し、同作用はPKC阻害剤とカルモジュリンキナーゼ (CaMK) 阻害剤の前投与によって抑制された。
以上より、視床下部細胞において、QRFPはCRF遺伝子発現を増加させ、HPA系の活性化に関与する可能性が示唆された。QRFPによるCRF遺伝子発現には、PKA及びPKC経路の関与が示唆された。更に、p-CREBの発現増加が、PKC阻害剤とCaMK阻害剤の前投与によって抑制されたことから、これらの経路がPKAの上流にあると考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
視床下部PVN細胞の代表である4B細胞を用いた検討は順調に行われ、学会発表することができた。視床下部細胞において、QRFP及びkisspeptinはCRF遺伝子発現を増加させることが証明され、更にHPA系の活性化に寄与する細胞内伝達機構を解明してきている。一方で、ラットにおけるCRF蛍光発現の検討結果がCRF遺伝子の発現変化を反映したものとはならなかったため、CRF mRNA遺伝子発現の変化についてはin situ hybridization法によってin vivoでのストレス反応を観察する予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
Kisspeptin及びQRFP誘導におけるCRF遺伝子発現及び転写活性を変化させる因子について検討し、細胞内伝達経路の詳細を更に解明する。Western法で転写因子CREBリン酸化、Fos/Jun蛋白発現の変化について検討し、これら因子の関与を調べることで、高血糖時や肥満に関わる要因とのホルモンの関係を細胞内伝達シグナルから解明する。
ラットin vivoで、血糖、脂質値の変化、in situ hybridization法によって視床下部kisspeptin及びQRFP mRNA発現の局在とその変化を検討する。更に、PVNでのCRFmRNA発現の変化を調べる。
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[Journal Article] Evaluation of the (1-24) adrenocorticotropin stimulation test for the diagnosis of primary aldosteronism.2016
Author(s)
Terui K, Kageyama K, Nigawara T, Moriyama T, Sakihara S, Takayasu S, Tsushima Y, Watanki Y, Yamagata S, Sugiyama A, Murasawa S, Nakada Y, Suda T, Daimon M.
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Journal Title
J Renin Angiotensin Aldosterone Syst.
Volume: 17
Pages: 1-6
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Lower aldosterone-renin ratio is a risk factor for total and cancer death in Japanese individuals: the Takahata Study.2015
Author(s)
Daimon M, Konta T, Oizumi T, Kameda W, Susa S, Terui K, Nigawara T, Kageyama K, Ueno Y, Kubota I, Yamashita H, Kayama T, Kato T.
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Journal Title
Clin Endocrinol (Oxf)
Volume: 82
Pages: 489-496
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Inhibitory effects of trichostatin A on adrenocorticotropic hormone production and proliferation of corticotroph tumor AtT-20 cells.2015
Author(s)
Nakada Y, Kageyama K, Sugiyama A, Desaki R, Takayasu S, Niioka K, Murasawa S, Ishigame N, Asari Y, Iwasaki Y, Daimon M.
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Journal Title
Endocr J
Volume: 62
Pages: 1083-1090
DOI
Peer Reviewed
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