2016 Fiscal Year Research-status Report
甲状腺自己免疫の研究:マウスにおける抗マウスTSH受容体免疫反応と中枢性免疫寛容
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15K09437
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Research Institution | Nagasaki University |
Principal Investigator |
永山 雄二 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 教授 (30274632)
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Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | バセドウ病 / TSH受容体 / 自己免疫 |
Outline of Annual Research Achievements |
胸腺細胞における自己抗原刺激の異なるマウスの作出と免疫反応の検討
H27年度での胸腺除去によるTSHRに対する中枢性免疫寛容破たんの実験で、甲状腺ホルモン上昇には至らなかったものの、抗TSHR抗体価の上昇がみられたことから、胸腺におけるTSHRの発現量の変化がTSHR免疫への感受性(すなわちバセドウ病発症の感受性)を変えるという仮説が証明されたことになる。 そこでH28年度は、さらにこの点を確認するため、胸腺細胞での情報伝達系に関与するZAP-70に変異を持つマウスを用いた。ZAP-70はMHC class IIと結合した自己抗原に刺激されたT細胞受容体の細胞内領域に結合して細胞内情報伝達、つまりT細胞の刺激ひいてはnegative selectionに関与する因子で、これに点突然変異を持つSKGマウスはZAP-70の機能低下のため自己反応性T細胞が除去されず、関節リウマチを自然発症する(Nature. 426: 454, 2003)。また、ZAP-70 KOホモマウスはT細胞受容体刺激後の細胞内情報伝達が欠如し免疫不全を呈する。 野生型とSKGマウスとZAP-70 KOマウスを交配して、ZAP-70wt/wt、ZAP-70wt/skg、ZAP-70wt/-、ZAP-70skg/skg、ZAP-70skg/-、ZAP-70-/-とZAP-70の発現量/細胞内シグナル強度が異なる種々のマウスを作出した。H29年度はこれらのマウスの抗TSHR自己免疫反応を比較検討する。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
マウスの交配に時間がかかったが、予定通り6種類のマウスを作出することができた。マウスのジェノタイプなどにも技術的な問題は発生しなかった。
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Strategy for Future Research Activity |
H29年度は、既報に従い、ヒト或いはマウスTSHR A-サブユニット発現アデノウイルスで3週間隔で2回免疫し、2回目免疫の2週後に採血して、抗TSHR抗体をFlow cytometryとTSAbアッセイ法で、甲状腺ホルモンをRIAで測定する。胸腺を摘出して、RNAを抽出し、RT-PCRでZAP-70及びTSHRの発現量を測定する。脾細胞を分離して、TSHR特異的サイトカイン分泌を比較検討する。
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Causes of Carryover |
H28年度は、マウスの交配が中心であったため。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成29年度の実験消耗品費用として使用する予定である。
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Research Products
(7 results)
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[Journal Article] Targeted Foxe1 overexpression in mouse thyroid causes the development of multinodular goiter but does not induce carcinogenesis.2016
Author(s)
Nikitski A, Saenko V, Shimamura M, Nakashima M, Matsuse M, Suzuki K, Rogounovitch T, Bogdanova T, Shibusawa N, Yamada M, Nagayama Y, Yamashita S, Mitsutake N.
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Journal Title
Endocrinology
Volume: 157
Pages: 2182-2195
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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