2015 Fiscal Year Research-status Report
赤血球特異的ノックダウン法による貧血モデルマウスの作製
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15K09447
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
藤原 亨 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (60333796)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 赤血球分化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、マウス赤血球特異的にshRNAを効果的かつ可逆的に発現させるin vivo解析系を確立すること、さらにその解析系を用いてLMO2のマウスin vivo赤芽球における意義を解明することである。具体的には、赤血球系の転写因子であるGATA-1プロモーター制御下にリバーステトラサイクリン制御性トランス活性化因子(rtTA)を発現させるトランスジェニックマウスと、テトラサイクリン応答因子(TRE)制御下にLmo2特異的shRNAを発現させるトランスジェニックマウスを作成し、両者を掛け合わせることにより目的のマウスを作成し、末梢血及び骨髄の評価、赤芽球における遺伝子発現プロファイル、LMO2制御下遺伝子群のLMO2を介した発現制御機構を解析することを目的としている。
2015年度は、GATA-1プロモーター制御下にリバーステトラサイクリン制御性トランス活性化因子(rtTA)を発現させるトランスジェニックマウスを作製し、同マウスにおいて、rtTAが赤芽球・巨核球・精巣などGATA-1発現細胞特異的に発現しているかどうか、テトラサイクリン投与後のマウスを用いたウエスタンブロット法により確認した。一方、テトラサイクリン応答因子(TRE)制御下にLmo2特異的shRNAを発現させるトランスジェニックマウスについては、Lmo2を効率的にノックダウンするshRNA配列を決定するところまで進めたため、目的のマウスの作製を現在進めている状況である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
赤血球系の転写因子であるGATA-1プロモーター制御下にリバーステトラサイクリン制御性トランス活性化因子(rtTA)を発現させるトランスジェニックマウス(Tg-G1HRD-rtTA)の樹立は成功している。現在は、テトラサイクリン応答因子(TRE)制御下にLmo2特異的shRNAを発現させるトランスジェニックマウスを作成しており、最終的に両者を掛け合わせることにより目的のマウスを作成する。
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| Strategy for Future Research Activity |
テトラサイクリン応答因子(TRE)制御下にLmo2特異的shRNAを発現させるトランスジェニックマウスの作製を進めていくが、一方でTg-G1HRD-rtTAマウスに対する適正なテトラサイクリン投与量および期間についても合わせて検討していく。
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| Causes of Carryover |
物品の納品の遅延によって生じたものである
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
物品納品に必要な経費として平成28年度請求額と合わせて使用する予定である
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