2015 Fiscal Year Research-status Report
正常造血及びMPN発症におけるCalreticulinの役割解明
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15K09480
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
北中 明 宮崎大学, 医学部, 准教授 (70343308)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
幣 光太郎 宮崎大学, 医学部, 助教 (20468028)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 骨髄増殖性腫瘍 / シグナル伝達 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
骨髄線維症の予後は不良であり、新規治療法の開発が切望されている。原発性骨髄線維症で約3割の患者に変異が認められるCalreticulin(CALR)について、野生型CALRの正常造血における役割、変異型CALRのMPN発症における役割を明らかにするため、以下の2つテーマについて研究を進めている。
1)変異CALRのin vitro機能解析：巨核球の形質を有する細胞株の中から、MPLを発現している細胞株をスクリーニングし４種類の株について、CRISPR/Cas9システムによりヒトと相同的なCALR変異のノックインを試み、CMK11-5、 F36P-MPLの2種類について成功した。CALR変異導入CMK11-5細胞では、細胞増殖、トロンボポエチン感受性の亢進が認められた。
2)正常CALR及び変異CALRのin vivo機能解析：CALR遺伝子のfloxマウス, KOマウスと血球特異的Cre-recombinaseを誘導できるMx-Creマウスを交配し、Mx-Cre, CALRflox/-マウスを作成した。この二重変異マウスではpIpCを投与により、血球特異的なCALR発現欠損が認められた。また、野生型マウス骨髄細胞にCALRの変異体を導入し成体マウスに移植したところ、血小板増多が認められ、骨髄移植モデルの作成に成功した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2つのテーマのうち, 後者については血球特異的CALR欠損マウスの作成に成功したことから、正常造血における野生型CALRの機能をin vivoで明らかにできると考えている。変異CALRの機能解析についても、導入血球細胞株、導入マウスモデルが作成できたことより、これらを用いた解析が次年度以降可能となる。
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| Strategy for Future Research Activity |
組換えマウスの繁殖スペース、レトロウイルスベクターの遺伝子導入効率など、平成27度で明らかになった課題を解決する方策を講じ、平成28度の研究計画に生かして計画を速やかに遂行するべく努力する。平成28年度内に本研究の成果の論文として公表することを目指す。
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[Journal Article] Gene expression profiling of loss of TET2 and/or JAK2V617F mutant hematopoietic stem cells from mouse models of myeloproliferative neoplasms.2016
Author(s)
Kameda T, Shide K, Yamaji T, Kamiunten A, Sekine M, Hidaka T, Kubuki Y, Sashida G, Aoyama K, Yoshimitsu M, Abe H, Miike T, Iwakiri H, Tahara Y, Yamamoto S, Hasuike S, Nagata K, Iwama A, Kitanaka A, Shimoda K
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Journal Title
Genom Data.
Volume: 4
Pages: 102-108
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Analysis of the molecular mechanism underlying bone marrow necrosis with acute lymphoblastic leukemia.2015
Author(s)
Moritake H, Obara M, Sameshima N, Asada Y, Komatsu H, Hyakuna N, Sugita K, Ishida Y, Kato M, Tanizawa A, Deguchi T, Imamura T, Kitanaka A, Shimoda K, Kamimura S, Nunoi H
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Journal Title
Int J Hematol.
Volume: 102
Pages: 349-356
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] TET2 Mutation in Adult T-Cell Leukemia/Lymphoma.2015
Author(s)
Shimoda K, Shide K, Kameda T, Hidaka T, Kubuki Y, Kamiunten A, Sekine M, Akizuki K, Shimoda H, Yamaji T, Nakamura K, Abe H, Miike T, Iwakiri H, Tahara Y, Sueta M, Yamamoto S, Hasuike S, Nagata K, Kitanaka A
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Journal Title
J Clin Exp Hematop.
Volume: 55
Pages: 145-149
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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