Quantitative assessment of TCR repertoire and allo-reactivity of human acute GVHD tissue-infiltrating T cells

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K09498
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 村田 誠 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (40378063)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 造血幹細胞移植 / 移植片対宿主病 / T細胞 / T細胞受容体 / 抗原

Outline of Annual Research Achievements

今年度は、新たに2名の急性GVHD患者から皮膚等のGVHD生検組織と同時期の末梢血の提供を受けた。それら試料からRNAを抽出し、T細胞受容体（TCR）遺伝子塩基配列のdeep sequenceを行った。そして組織浸潤T細胞のTCR塩基配列と末梢血中T細胞のTCR塩基配列を照合、比較した。
本研究期間全体の研究実績をまとめる。計8名の急性GVHD患者から生検組織12個と同時期の末梢血8本の提供を受けた。症例1のGVHD皮膚より、患者由来細胞を傷害するがドナー由来細胞を傷害しない2つのアロ反応性T細胞クローンを分離した。これら2つのアロ反応性T細胞クローンのTCRbeta CDR3アミノ酸配列は、その皮膚GVHD組織における頻度第1位および第2位のTCRbeta CDR3アミノ酸配列と同一であり、皮膚浸潤T細胞全体におけるそれら2つの占める割合は98%だった。症例2の皮膚、胃、大腸GVHD組織における頻度第1位のT細胞クローンは、それぞれ組織浸潤T細胞全体の93%、64%、99%を占めており、またそれらT細胞クローンは組織ごとに異なっていた。生検組織中T細胞の多様性をシンプソンの多様性指数（1/Ds）で評価したところ、GVHD組織浸潤T細胞は同時期の末梢血中T細胞と比べて多様性が有意に低かった。グレードIIIのGVHD生検組織はグレードI-IIのGVHD生検組織と比べて組織浸潤T細胞の多様性（1/Ds）が有意に低く、またステロイド抵抗性GVHDの生検組織はステロイド感受性GVHDの生検組織と比べて組織浸潤T細胞の多様性（1/Ds）が有意に低かった。

Research Products

• [Journal Article] High incidence of extensive chronic graft-versus-host disease in patients with the REG3A rs7588571 non-GG genotype. (2017)
  • Author(s): Koyama D, Murata M, Hanajiri R, Okuno S, Kamoshita S, Julamanee J, Takagi E, Hirano D, Miyao K, Sakemura R, Goto T, Hayakawa F, Seto A, Ozawa Y, Miyamura K, Terakura S, Nishida T, Kiyoi H.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 12 Pages: e0185213
  • DOI: doi: 10.1371/journal.pone.0185213.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Safety and persistence of WT1-specific T-cell receptor gene-transduced lymphocytes in patients with AML and MDS. (2017)
  • Author(s): Tawara I, Kageyama S, Miyahara Y, Fujiwara H, Nishida T, Akatsuka Y, Ikeda H, Tanimoto K, Terakura S, Murata M, Inaguma Y, Masuya M, Inoue N, Kidokoro T, Okamoto S, Tomura D, Chono H, Nukaya I, Mineno J, Naoe T, Emi N, Yasukawa M, Katayama N, Shiku H.
  • Journal Title: Blood Volume: 130 Pages: 1985-1994
  • DOI: doi: 10.1182/blood-2017-06-791202.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Impact of the presence of HLA 1-locus mismatch and the use of low-dose antithymocyte globulin in unrelated bone marrow transplantation. (2017)
  • Author(s): Kawamura K, Kanda J, Fuji S, Murata M, Ikegame K, Yoshioka K, Fukuda T, Ozawa Y, Uchida N, Iwato K, Sakura T, Hidaka M, Hashimoto H, Ichinohe T, Atsuta Y, Kanda Y.
  • Journal Title: Bone Marrow Transplantation Volume: 52 Pages: 1390-1398
  • DOI: doi: 10.1038/bmt.2017.153.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Phase 2 study of intrabone single unit cord blood transplantation for hematological malignancies. (2017)
  • Author(s): Murata M, Maeda Y, Masuko M, Onishi Y, Endo T, Terakura S, Ishikawa Y, Iriyama C, Ushijima Y, Goto T, Fujii N, Tanimoto M, Kobayashi H, Shibasaki Y, Fukuhara N, Inamoto Y, Suzuki R, Kodera Y, Matsushita T, Kiyoi H, Naoe T, Nishida T.
  • Journal Title: Cancer Science Volume: 108 Pages: 1634-1639
  • DOI: doi: 10.1111/cas.13291.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Graft-versus-host disease prophylaxis after single-unit reduced intensity conditioning cord blood transplantation in adults with acute leukemia. (2017)
  • Author(s): Terakura S, Kuwatsuka Y, Yamasaki S, Wake A, Kanda J, Inamoto Y, Mizuta S, Yamaguchi T, Uchida N, Kouzai Y, Aotsuka N, Ogawa H, Kanamori H, Nishiwaki K, Miyakoshi S, Onizuka M, Amano I, Fukuda T, Ichinohe T, Atsuta Y, Murata M, Teshima T.
  • Journal Title: Bone Marrow Transplantation Volume: 52 Pages: 1261-1267
  • DOI: doi: 10.1038/bmt.2017.116.
  • Peer Reviewed
• [Presentation] High incidence of extensive chronic GVHD in patients with the REG3A rs7588571 non-GG genotype. (2018)
  • Author(s): Murata M, Koyama D, Hanajiri R, Okuno S, Kamoshita S, Julamanee J, Takagi E, Hirano D, Miyao K, Sakemura R, Goto T, Hayakawa F, Seto A, Ozawa Y, Miyamura K, Terakura S, Nishida T, Kiyoi H.
  • Organizer: 2018 BMT Tandem Meetings
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] HSCTの課題克服に向けて ～GVHD制御の観点から～. (2018)
  • Author(s): 村田 誠
  • Organizer: 第40回日本造血細胞移植学会総会
  • Invited
• [Presentation] Quantitative assessment of TCR repertoire and allo-reactivity of human acute GVHD tissue-infiltrating T cells. (2017)
  • Author(s): Koyama D, Murata M, Hanajiri R, Okuno S, Kamoshita S, Takagi E, Julamanee J, Miyao K, Sakemura R, Goto T, Terakura S, Nishida T, Kiyoi H.
  • Organizer: The 59th annual meeting of the American Society of Hematology
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The Synergistic T-Cell Signal By CD79A/CD40 Costimulatory Endodomain Enhances CD19 Chimeric Antigen Receptor T-Cell Proliferation and Survival. (2017)
  • Author(s): Julamanee J, Terakura S, Sakemura R, Miyao K, Okuno S, Kamoshita S, Takagi E, Koyama D, Goto T, Hanajiri R, Nishida T, Murata M, Kiyoi H.
  • Organizer: The 59th annual meeting of the American Society of Hematology
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Improvement of antigen-specific CTL persistence by transduction of novel artificial adapter molecule. (2017)
  • Author(s): Miyao K, Watanabe K, Terakura S, Hamana H, Kishi H, Nishida T, Murata M, Kiyoi H.
  • Organizer: The 8th JSH International Symposium 2017
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] ヒト急性GVHDにおける組織浸潤アロ反応性T細胞レパトアの定量的評価. (2017)
  • Author(s): 小山大輔、村田 誠、葉名尻 良、奥野真吾、鴨下園子、高木えり奈、Jakrawadee Julamanee、宮尾康太郎、後藤辰徳、酒村玲央奈、寺倉精太郎、西田徹也、清井 仁.
  • Organizer: 第79回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 急性白血病に対する減量前治療を用いた臍帯血移植におけるGVHD予防法の比較研究. (2017)
  • Author(s): 寺倉精太郎、鍬塚八千代、山崎 聡、和氣 敦、諫田淳也、稲本賢弘、水田秀一、山口拓洋、内田直之、香西康司、青墳信之、小川啓恭、金森平和、西脇嘉一、宮腰重三郎、鬼塚真仁、天野逸人、福田隆浩、一戸辰夫、熱田由子、村田 誠、豊嶋崇徳.
  • Organizer: 第79回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 新規人工アダプター分子の遺伝子導入は抗原特異的CTLのpersistenceを向上させる. (2017)
  • Author(s): 宮尾康太郎、寺倉精太郎、奥野真吾、渡邊慶介、浜名 洋、岸 裕幸、酒村玲央奈、Jakrawadee Julamanee、後藤辰徳、西田徹也、村田 誠、清井 仁.
  • Organizer: 第9回血液疾患免疫療法学会学術集会