2016 Fiscal Year Research-status Report
自己免疫寛容の誘導を目的としたmTOR阻害剤によるTregワクチン療法の開発
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15K09555
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
前田 伸治 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (80381854)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 関節炎 / 免疫寛容 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１）関節炎モデルマウス（SKGマウス）を用いた「関節炎を惹起→Tregコンバージョン誘導実験」。mTOR阻害剤（everolimus)を関節局所（リポソーム使用）、全身投与（腹腔内）を行ったのちにmIL-2/IL-2Ab complex(以下mIL2cx)を投与し、関節炎の改善の有無を検討した。Tregは著増したが、関節炎の改善は認めなかった。一方、非炎症病態（非関節炎時）に投与したmIL2cxは、関節炎発症の予防効果を認めた。背景にある炎症病態が、mIL2cxによるTreg増加のみならず非TregのCD25陽性活性化Ｔ細胞を活性化させる可能性が示され、現在、炎症病態を直接阻害する薬剤の併用を行うことで、自己免疫寛容を再誘導する方法を検討している。現在、IL-6受容体抗体、TNFα阻害剤、CTLA-4-Ig（Abatacept)、JAK1/2阻害剤（Balicitinib)の併用を行うことで、CD25陽性のTreg、非Treg（活性化T細胞）のバランスの変化を行い、最適の組み合わせを検討している。
２）ヒトの末梢血T細胞を移入したNOGマウスを用いたxeno-GVHDモデルにおけるIL-2/IL-2Ab complex(以下hIL2cx)の検討。hIL2cxにより一過性のTreg(CD4+CD25+Foxp3+)増加を確認し、早期投与の方がxGVHDを抑制したが、その後の検討でhIL2cx非投与と比べるとxGVHDは悪化することが示された。hIL2cxにより、Treg増加のみならず、Th1/Th17(IFNγ+IL-17+CD4 Tcells)も増加することが確認された。ヒト免疫細胞においても、背景にある炎症病態がTregによる自己免疫寛容誘導の阻害要因となると考えられ、ヒトTh1/Th17(Th17.1)細胞をターゲットとした免疫抑制治療が重要である可能性が示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
関節炎モデルマウス、およびヒトＰＢＭＣを用いたxeno-GVHDモデル、の両方において、IL-2/IL-2Ab complex(以下IL2cx)はTregの増加は認めるものの、関節炎およびGVHDの十分改善を認めなかった。このため、さらに追加研究として炎症病態を抑制する薬剤（JAK阻害剤、TNFα阻害剤など）を併用し、炎症病態を抑制しつつTregを誘導する方法の探索を行っている。このため、当初の予定よりやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
H29年度前半は、引き続き炎症病態を抑制する薬剤（TNFα阻害剤、IL6受容体抗体、JAK1/2阻害剤）を併用して関節炎モデルマウス、xGVHD-NOGマウスにおけるIL2cxの効果を確認する。最も炎症病態を抑制し、かつTregを誘導する炎症阻害剤を同定し、これとIL-2cxの組み合わせにより、Tregワクチン療法が可能であるか検討する。
H29年度後半は、マウスにおいて、関節抗原への反応を予定しているが、それに加えて、次世代シークエンスを用いたTCRレパトア解析を予定している（受託解析の予定）。炎症抑制薬+mTOR+IL2cxで誘導されるTregのレパトアと、関節炎部位の活性化Ｔ細胞のレパトアの相同性を解析し、薬剤を使用せず誘導しなかった場合のTregと比較して、どの程度TCRレパトアが変化するかを直接解析できる。
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| Causes of Carryover |
予想に反して、mTOR阻害剤とIL-2cxの併用投与により、関節炎モデルマウスの関節炎病態が改善しなかったため、抗原特異的Tregの解析に無理に進めず、他の炎症阻害剤を併用して関節炎病態を改善する方法を探索した。このため、抗原特異的Treg解析に用いる予定であった、セルソーティング用の蛍光抗体（フローサイトメトリー用）や実験器具、マウスの購入を控えたため残額が残った。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
追加検討が必要となった、炎症阻害剤として、TNFα阻害剤、IL-6受容体抗体（マウス）、CTLA4-Ig、JAK1/2阻害剤を用いるため、それらの薬剤の購入と、セルソーター用の抗体の購入に次年度使用額をあてる予定である。
翌年度(H29年度）分は、これら炎症病態を抑制する薬剤（TNFα阻害剤、IL6受容体抗体、JAK1/2阻害剤）を併用した関節炎モデルマウス、xGVHD-NOGマウスにおけるIL2cxの効果を確認するためのマウス購入、および解析するための実験器具、フローサイトメトリー抗体の購入にあてる。また、TregのTCRレパトアの解析に、次世代シークエンスを用いたTCRレパトア解析を予定（受託解析の予定）これらの解析に使用する
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Research Products
(2 results)
