クラミジア感染によって誘導される炎症応答の制御システムの探索

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K09561
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 松尾 淳司 北海道大学, 保健科学研究院, 講師 (50359486)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中村 眞二 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40207882) ; 山口 博之 北海道大学, 保健科学研究院, 教授 (40221650)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: クラミジア / 炎症性サイトカイン

Outline of Annual Research Achievements

偏性細胞内寄生細菌であるクラミジアは、単に呼吸器感染症や性行為感染症の起因菌となるだけでなく、動脈硬化や気管支喘息、あるいは関節炎などの慢性炎症性疾患への関与が示唆されている。そのためクラミジアによる炎症誘導機構の解明はクラミジア感染症の抜本的な予防・治療法の開発に極めて有効であると考えられる。これまでのところ、クラミジアがTLR依存的に炎症性サイトカインを分泌誘導することが明らかとされてきた。その一方、細菌感染の炎症誘導におけるnon‐TLRシグナルの役割が報告されており、これら分子を介した炎症応答・制御機構の解明は、クラミジア感染における宿主炎症応答の理解に必要と考えられる。そこで、本研究ではクラミジア感染を感知するレセプターの探索を試みた。まず肺炎クラミジアおよび単球系細胞であるTHP‐1細胞を用いて、ELISA法にて炎症性サイトカインIL‐8の分泌を確認した。その結果、肺炎クラミジアが濃度依存的にTHP‐1細胞からIL‐8の分泌を誘導することが確認された。次に、阻害剤を用いた実験により、クラミジアのレセプターの探索を試みた。またクラミジアとレセプターとの相互作用を確認するために、大腸菌を用いてタグ付けした組換え体を作製するとともに、タグ付けしたレセプターを過剰発現した細胞の構築も行った。現在、これら組換え体を用いて、クラミジアとレセプターの相互作用を検討し、レセプターの同定を試みている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本年度は、阻害剤を用いた実験から、non‐TLR レセプター候補が見出された。現在、そのさらなる相互作用やシグナル応答を明らかにするために、組換え体の作成し、実験を行っている。このように、クラミジア感染における炎症誘導にnon‐TLR レセプターの関与が明らかとできたので、当初の目標は達成できたと判断した。

Strategy for Future Research Activity

次年度は、クラミジアによる炎症性サイトカイン誘導にnon‐TLR レセプターがどのように関与しているか明らかにするために、組換え体を用いた相互作用解析を試みる。さらに、炎症誘導における細胞内の制御機構を遺伝子発現解析にて行う予定である。

Causes of Carryover

本年度は、本研究課題を効率的に運用したため、若干の次年度繰越金が生じた。そのため、次年度に使用予定の経費と併せて、本研究を完遂できるように阻害剤や抗体などを用いた実験に使用する。

Expenditure Plan for Carryover Budget

次年度は、細胞培養に関る培地・消耗品、阻害剤や抗体を用いた実験に加えて、研究成果発表にかかわる旅費に必要な費用に充当する予定である。