2016 Fiscal Year Research-status Report
小児褐色細胞腫/パラガングリオーマの発症機序の解明
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15K09633
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| Research Institution | Kanagawa Children's Medical Center (Clinical Research Institute) |
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Principal Investigator |
室谷 浩二 地方独立行政法人神奈川県立病院機構神奈川県立こども医療センター(臨床研究所), 臨床研究所, 医長 (60239556)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 褐色細胞腫 / パラガングリオーマ / VHL / SDHB |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では，小児褐色細胞腫/パラガングリオーマ（以下PCC/PGL）患者の臨床および分子遺伝学的解析を行うことにより，小児患者の特徴を明らかとし，早期発見，適切な治療に向けた指針を示すことを目的としている．
PCC/PGL患者8例を集積し，臨床症状を検討した．発症年齢は6-15歳，内訳は，片側PCC5例，両側PCC1例，片側PGL2例であった．全例，高血圧以外の非特異的な症状を主訴に初診していた．成人症例では，高血圧に加えて，頭痛，動悸，発汗過多が3主徴と言われているが，今回の8症例では，これら3主徴が揃わない症例が多くみられた．小児では高血圧以外の非特異的症状を初発とする場合が多いことから，しばしば診断確定に長期間を要していると推測される．日常診療における血圧測定の重要性や，非特異的症状から褐色細胞腫の可能性を想起することを，広く一般小児科医に啓蒙していく必要があるものと考えられた．
今回集積したPCC/PGL8症例からインフォームド・コンセントを取得後，末梢血白血球および摘出した腫瘍からゲノムDNAを抽出した．分子遺伝学的解析の結果，8例中6例に，末梢血and/or腫瘍組織で，VHL，SDHB変異を証明した．末梢血由来DNAで変異（生殖細胞系列変異）が同定されたものは4例であった．生殖細胞系列変異の同定されなかった4例のうち2例で腫瘍組織由来DNAでの変異（体細胞変異）を同定した．生殖細胞系列変異の同定された4例のうち1例で，生殖細胞系列変異に加えて体細胞変異（2nd hit）を同定した．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
新たな症例を2例追加し，合計8例の解析を行った点は，当初の計画を上回っている．
当初の計画では，（1）末梢血由来DNA，腫瘍由来DNAを用いたSanger法による遺伝子変異解析（RET，VHL，SDHB，SDHD）（2）腫瘍由来DNAを対象としたMLPA法による欠失解析（VHL，SDHB，SDHD）（3）病理組織学的検討（i）GAPP分類を行い，「転移の有無」と比較検討する（ii）SDHB免疫染色を行い，遺伝子解析結果と比較検討する（4）臨床情報の収集 である．
これらの計画のうち，計画（1）および 計画（4）については全例で実施済み．計画（2）については，6例で実施済み，2例で解析途中，計画（3）については，2例で実施できておらず，来年度以降に実施予定．
以上から，予定した計画は，概ね順調に経過していると判断している．
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| Strategy for Future Research Activity |
今後，さらなる病態解明を目指し，
1．VHL体細胞変異のみを認めた症例において，腫瘍組織でのVHL遺伝子プロモーター領域のメチル化解析
2．生殖細胞系列変異，体細胞変異いずれも認めなかった症例において，他の既知遺伝子を対象としたSanger法による解析，腫瘍組織でのアレイCGH解析
を行う方針である．
加えて，腫瘍組織の病理組織標本を用いてGAPP分類，SDHB免疫染色を完了し，悪性化，変異遺伝子との関連性を検討する計画である．
最終年度には，全ての結果をまとめ，英文論文化の方針である．
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| Causes of Carryover |
計画通りに研究が進まない部分があり，一部の試薬を購入しなかったため，未使用額が発生した．
最終年度に使用予定である（次項目を参照のこと）
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
最終年度に，使用予定の試薬庫移入費，英文論文投稿にあたっての費用（校閲代金，別冊代）などにあてる方針である．
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