2017 Fiscal Year Annual Research Report
Pathological analysis of acute graft-versus-host disease and development of molecular targeted therapy for acute GVHD
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15K09657
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
山本 雅樹 札幌医科大学, 医学部, 講師 (80404664)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀 司 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (20398324)
斉藤 淳人 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (40749420)
五十嵐 敬太 札幌医科大学, 医学部, 助教 (70580017)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 移植片対宿主病 / ケモカイン / CCL8 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
背景：ケモカインCCL8はヒトGVHD患者及びマウスGVHDモデルの血漿中で上昇していることが示され、GVHDのバイオマーカーとして期待されている。これまでの我々の研究で、MHCの異なるマウス間での骨髄移植ではケモカインCCL8が血漿中に高濃度で検出され、GVHDの病勢、早期死亡率と相関する事が明らかとなっている。またin vitro CCL8発現系では、MHCの異なるマウスの脾臓細胞を混合培養（白血球混合培養）する事で培養上清中にCCL8タンパクが高濃度に発現する事を明らかにしてきた。この系においてCCL8タンパクの発現は誘導刺激となるサイトカインをブロックする事により低下する。また我々はCCL8 ノックアウトマウス（CCL8 KO) を作成し、ケモカインCCL8の機能解析をすすめている。
実験方法：wild type Balb/c、wild type C57BL/6、CCL8 KO Balb/c, CCL8 KO C57BL/6の脾臓細胞による白血球混合培養系で遺伝子操作によるCCL8のmRNA発現knockdownを試みた。CCL8 KOマウス細胞を用いた白血球混合培養と、CCL8 knock downしたものとを比較して、in vitro RNAiの可能性を検討した。
ドナーレシピエントともwild typeの組合わせでは培養上清中にCCL8タンパクの発現がみられるが、CCL8KOマウス脾臓由来細胞を用いた白血球混合培養では、CCL8タンパクの発現は見られなかった。CCL8 mRNAに対するsiRNAを白血球混合培養系に加える事によりCCL8タンパクの発現は若干低下した。様々な遺伝子操作によってCCL8の発現はコントロール出来る可能性が示された。
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[Journal Article] Early expression of serum CCL8 closely correlates with non-relapse mortality after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation.2017
Author(s)
Masaki Yamamoto, Tsukasa Hori, Naoki Hatakeyama, Keita Igarashi, Natsuko Inazawa, Nobuhiro Suzuki, Norio Takei, Yoichi M. Ito, Kamikaze Matsumoto, Koji Kato, Hiroyuki Tsutsumi, Yasuo Kokai
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Journal Title
札幌医学雑誌
Volume: 86
Pages: 45-51
DOI
Peer Reviewed
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