核成分に対する免疫寛容の破綻からSLE発症に至る機序の解明

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K09779
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 宮川 史 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (00346024)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 浅田 秀夫 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (60252681)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: SLE / 抗核抗体 / I型IFN / NF-kB / IRF7 / IRF8 / 炎症性単球

Outline of Annual Research Achievements

インターフェロン制御因子（IRF）7、8は、全身性エリテマトーデス（SLE）の疾患感受性遺伝子であることが知られているが、SLEの病態における役割についてはよく分かっていない。野生型マウスにプリスタンを投与すると、自己抗体の産生、糸球体腎炎等、ヒトのSLEに類似した症状を誘発することができる。我々はまずSLEにおけるIRF7の役割を検討するために、IRF7ノックアウト（KO）マウスにプリスタンを投与した。IRF7KOマウスは、野生型マウスと同程度に糸球体腎炎を発症したが、自己抗体の産生は認められず、糸球体腎炎の発症と自己抗体の産生の間に解離がみられた。我々は、自己抗体の産生にはIRF7/I型IFN経路が、糸球体腎炎等の臓器障害にはNF-kB経路が重要な役割を果たしていることを証明し、昨年論文に報告した。また昨年度よりIRF8KOマウスにも同様の実験を行っている。予備実験では、IRF8KOマウスにプリスタンを投与すると、野生型マウスよりも糸球体腎炎の程度が軽減するという結果が得られている。野生型マウス、IRF7KOマウスではプリスタン投与により腎障害が生じてくることより、これらのマウスにおいて腎障害を含めた臓器障害の原因となりうる細胞の同定を試みている。予備実験では、野生型マウス、IRF7KOマウスにおいてはプリスタン投与により炎症性単球が浸潤してくるが、IRF8KOマウスでは浸潤がみられないことよりIRF8KOマウスの腎障害に炎症性単球が関与している可能性があり、現在解析中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

IRF7KOマウスを用いた実験計画は完成し、昨年国際誌に論文を発表した。IRF8KOマウスを用いた実験計画については、現在実験を進めている最中である。

Strategy for Future Research Activity

まずプリスタン投与後のIRF8KOマウスの臨床症状を詳細に検討する。野生型マウスとIRF8KOマウスに、PBS（陰性コントロール）あるいはプリスタンを腹腔内投与し、約10ヶ月後に尿検査、静脈採血、腎臓の採取を行う。尿蛋白の量は採取した尿を用いて尿試験紙により定量し、腎障害の有無を両系統のマウスで比較する。静脈血から血清を遠心分離し、血清中の抗核抗体の有無はHep-2細胞を用いた蛍光抗体間接法で確認する。さらにELISA法を用いて、抗核抗体および抗dsDNA、ssDNA、RNP、Sm抗体の測定を行う。次に炎症性単球が臓器障害に果たす役割について検討する。野生型マウスにプリスタンを投与すると、２週間後に腹腔内に炎症性単球が浸潤してくることが分かっている。浸潤してきた炎症性単球をsortingし、IRF8KOマウスに投与することで腎障害が誘発されるかを検討する。また炎症性単球がNF-kB経路のtarget geneであるTNF-α、IL-6等の炎症性サイトカインを産生するかを、IRF8KOマウスに移入後に血清を採取しELISA法で測定、あるいはsortingした炎症性単球の細胞内染色をすることで確認する。

Research Products

• [Journal Article] Essential requirement for IFN regulatory factor 7 in autoantibody production but not development of nephritis in murine lupus. (2016)
  • Author(s): Miyagawa F, Tagaya Y, Ozato K, Asada H
  • Journal Title: J Immunol Volume: 197 Pages: 2167-2176
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1502445.
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Clinical and immunologic features of recurrent herpes zoster (HZ). (2016)
  • Author(s): Nakamura Y, Miyagawa F, Okazaki A, Okuno Y, Mori Y, Iso H, Yamanishi K, Asada H; Shozu Herpes Zoster Study Group
  • Journal Title: J Am Acad Dermatol Volume: 75 Pages: 950-956
  • DOI: 10.1016/j.jaad.2016.05.037.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Preferential expression of CD134, an HHV-6 cellular receptor, on CD4 T cells in drug-induced hypersensitivity syndrome (DIHS)/ drug reaction with eosinophilia and systemic symptomes (DRESS). (2016)
  • Author(s): Miyagawa F, Nakamura Y, Miyashita K, Iioka H, Himuro Y, Ogawa K, Nishimura C, Nishikawa M, Mitsui Y, Ito Y, Ommori R, Mori Y, Asada H
  • Journal Title: J Dermatol Sci Volume: 83 Pages: 151-154
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2016.05.001.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Adult case of staphylococcal scalded skin syndrome differentiated from toxic epidermal necrolysis with the aid of dermoscopy. (2016)
  • Author(s): Miyashita K, Ogawa K, Iioka H, Miyagawa F, Okazaki A, Kobayashi N, Asada H
  • Journal Title: J Dermatol Volume: 43 Pages: 842-843
  • DOI: 10.1111/1346-8138.13281.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Involvement of Human Herpesvirus 6 Infection in Renal Dysfunction Associated with DIHS/DRESS. (2016)
  • Author(s): Miyashita K, Shobatake C, Miyagawa F, Kobayashi N, Onmori R, Yonekawa S, Tanabe K, Kawate K, Morita K, Asada H
  • Journal Title: Acta Derm Venereol Volume: 96 Pages: 114-115
  • DOI: 10.2340/00015555-2149.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Essential requirement for Interferon regulatory factor 7 in autoantibody production but not development of nephritis in murine lupus. (2016)
  • Author(s): Miyagawa F, Asada H
  • Organizer: The 41st Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • Place of Presentation: Sendai, Japan
  • Year and Date: 2016-12-09 – 2016-12-11
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The assessment of vascularity in subcutaneous tumors by ultrasonography. (2016)
  • Author(s): Shobatake C, Hirai T, Ogawa K, Miyagawa F, Azukizawa H, Asada H
  • Organizer: The 41st Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • Place of Presentation: Sendai, Japan
  • Year and Date: 2016-12-09 – 2016-12-11
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The characteristics of patients with persistent HHV-6 infection after drug-induced hypersensitivity syndrome (DIHS). (2016)
  • Author(s): Nakamura Y, Miyashita K, Onmori R, Miyagawa F, Azukizawa H, Asada H
  • Organizer: The 41st Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • Place of Presentation: Sendai, Japan
  • Year and Date: 2016-12-09 – 2016-12-11
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Up-regulation of HHV-6 microRNAs in the serum of DIHS/DRESS patients. (2016)
  • Author(s): Miyashita K, Miyagawa F, Nakamura Y, Onmori R, Azukizawa H, Asada H
  • Organizer: The 41st Annual Meeting of the Japanese Society for Investigative Dermatology
  • Place of Presentation: Sendai, Japan
  • Year and Date: 2016-12-09 – 2016-12-11
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Preferential expression of CD134, HHV-6 cellular receptor, on CD4 T cells in drug-induced hypersensitivity syndrome/drug reaction with eosinophilia and systemic symptoms. (2016)
  • Author(s): Miyagawa F, Nakamura Y, Asada H
  • Organizer: The 75th Annual Meeting of the Society for Investigative Dermatology
  • Place of Presentation: Scottsdale, AZ, USA
  • Year and Date: 2016-05-11 – 2016-05-14
  • Int'l Joint Research
• [Book] Graft Versus Host Disease (GVHD), Immunology of the Skin (2016)
  • Author(s): Miyagawa F, Katz SI
  • Total Pages: 21
  • Publisher: Springer Japan