ストレス応答MAPキナーゼASK1による尋常性乾癬の発症の制御

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K09787
• Research Institution: Tokyo Medical University
• Principal Investigator: 大久保 ゆかり 東京医科大学, 医学部, 教授 (40233530)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 善本 隆之 東京医科大学, 医学部, 教授 (80202406)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: ASK1 / IL-22 / 尋常性乾癬

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、ベセルナクリームの頻回塗布により誘導するIMQ 誘導性乾癬モデルとIL-22 蛋白の皮内頻回投与で誘導する乾癬モデルを用いて、野生型とASK1 欠損マウス、さらにIL-22 欠損マウスを比較検討しながら、ASK1 の乾癬発症や病態形成における役割を明らかにする。
前年度の結果を踏まえ、今年度は炎症症状増加の作用機序としてASK1 がベセルナクリーム塗布後の初期の細胞死誘導と増殖抑制、炎症性サイトカイン産生に関与しているかを調べた。具体的にはベセルナクリーム塗布1、3、5 日後、皮膚組織切片のTunel 染色により細胞死の割合や抗Ki67 抗体を用いて増殖している細胞の割合、Involucrin やトランスグルタミナーゼなどの分化マーカーの抗体を用いた免疫組織学的解析、さらにRNA を抽出しリアルタイムRT-PCR によりこれらの分化マーカーとIL-1α やIL-1β、IL-17、IL-22、IL-23、TNF-α などの炎症性サイトカインのmRNA 発現を調べた。
野生型とASK1欠損マウスをそれぞれを1、3、5日後で比較した結果、組織学的にはASK1欠損マウスの方が表皮角化細胞の増殖、炎症性サイトカイン産生は見られたが、明らかな差は確認できなかった。しかし5日後以降は炎症症状が鎮静化してしまうため、比較が困難であった。そこで、まず1日目と2日目のみで比較・検討をし、有意な差を確認した。今後は個体数を増やし、1-5日間を時系列で比較していく予定である。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

予期していなかった結果となったため、当初の計画通りには進んでいない

Strategy for Future Research Activity

本研究の基礎なる部分の結果が芳しくなく、研究の進行は滞っている。しかし、本研究にとって重要な事なので検討し続けることは意味があると考える。また、その結果によって今後の研究の発展につながると考える。

Causes of Carryover

研究計画が遅れているため、次年度使用額が出てしまった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

今後も当初の予定通り分子生物・生化学関連試薬、免疫・組織学関連試薬、培養関連試薬、プラスチック・ガラス器具、実験動物などの消耗品費を購入していきたい。特に実験動物関連の費用が増えてしまっているので、差額分はそちらに充てたい。