2015 Fiscal Year Research-status Report
大動脈解離におけるマクロファージ分化制御機構の解明と治療応用への挑戦
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15K10249
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| Research Institution | Kurume University |
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Principal Investigator |
大野 聡子 久留米大学, 医学部, 助教 (80569418)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
青木 浩樹 久留米大学, 付置研究所, 教授 (60322244)
田中 啓之 久留米大学, 医学部, 教授 (70197466)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 大動脈解離 / マクロファージ / サイトカイン / 細胞増殖 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
大動脈解離は大血管が破綻して死に至る重篤な疾患である。保存的治療や外科的治療が行われるが、効果的な内科的治療はなく、また予防法もない。
我々は大動脈に血行動態的負荷をかけると微小な血管障害を生じる事、またマクロファージ特異的にIL-6系シグナルを亢進すると血管障害から大動脈解離へ進展する事を発見した。大動脈組織の遺伝子発現を調べたところ、血管障害を発症する前から細胞増殖に関わる遺伝子発現が亢進し、血管障害後は炎症応答に関わる遺伝子発現が亢進していた。さらに、IL-6系シグナルを亢進したマウスではそれぞれの遺伝子発現がより強く見られ、一方で平滑筋機能や細胞外マトリックス代謝に関わる遺伝子発現が抑制されていた。
細胞増殖と炎症応答について、組織で起こる変化を調べたところ、免疫蛍光染色により中膜、外膜の細胞で細胞増殖が亢進していることが判明した。また、血管障害に浸潤したマクロファージはIL-6系シグナル亢進により炎症性のM1マクロファージに分化していることが判明した。
当該年度はヒトの大動脈解離におけるIL-6系シグナルとマクロファージの動向を免疫蛍光染色で調べた。また、マウスモデルにおける血管平滑筋の機能分化について、マーカータンパクの解析を開始した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
マウス解離モデルを使用したこれまでの研究により、IL-6系シグナルを亢進したmSocs3-KOでは解離へ進展する事があきらかとなった。本年度はヒト大動脈組織を用いて、IL-6系シグナルの下流分子である活性化STAT3とマクロファージの二重戦色を行った。ヒト大動脈解離の組織では、外膜と中膜外側を中心にマクロファージSTAT3が活性化していた。さらに、解離の先端方向にある非解離組織では解離部よりも強くマクロファージSTAT3が活性化しており、マクロファージSTAT3が解離の進展に重要である事が示唆された。
また、mSocs3-KOで平滑筋機能に関連する遺伝子発現が抑制されていたことを受け、大動脈の平滑筋分化マーカーについてウェスタンブロットによる解析を開始している。
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| Strategy for Future Research Activity |
1. 平滑筋機能
マウス大動脈の平滑筋分化マーカーの解析を継続し、野生形とmSocs3-KOで平滑筋分化状態を比較する。
2. マクロファージSTAT3
既知の培養実験ではSTAT3活性化マクロファージはM1分化能が高い事がしられており、本研究でも大動脈組織のフローサイトメトリーによるとmSocs3-KOではM1/M2マクロファージ比が高くなっていた。本年度に確立したマクロファージと活性化STAT3の二重染色プロトコールを用い、マウス大動脈におけるマクロファージSTAT3活性化について野生形とmSocs3-KOを比較する。
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| Causes of Carryover |
1. 平滑筋機能: マウス大動脈の平滑筋分化マーカーの解析を継続し、野生形とmSocs3-KOで平滑筋分化状態を比較する。
2. マクロファージSTAT3: 既知の培養実験ではSTAT3活性化マクロファージはM1分化能が高い事がしられており、本研究でも大動脈組織のフローサイトメトリーによるとmSocs3-KOではM1/M2マクロファージ比が高くなっていた。本年度に確立したマクロファージと活性化STAT3の二重染色プロトコールを用い、マウス大動脈におけるマクロファージSTAT3活性化について野生形とmSocs3-KOを比較する。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
マウスへの薬物投与実験、ノックアウトマウス作成に使用する。
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