2015 Fiscal Year Research-status Report
microRNAをターゲットとした新規骨再生療法の開発
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15K10443
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
大江 啓介 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 医学研究員 (20514623)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
新倉 隆宏 神戸大学, 医学部附属病院, 特命講師 (40448171)
李 相亮 神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (40533732)
岩倉 崇 神戸大学, 医学部附属病院, 医員 (60437473)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | miRNA / 骨折 / 偽関節 / 難治性骨折 / 血管新生 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
骨折治癒において重要な役割を果たすmiRNAを明らかとするため、ラット大腿骨骨折における骨折後5・11・14日目の骨折部でのmiRNAの発現をマイクロアレイにて網羅的に解析した。具体的には、骨折モデルとしてラット（Sprague-Dawley, 12週齢）の大腿骨骨折髄内釘固定モデルを用いた。骨折作成後5・11・14日目に、骨折部の組織を採取し、miRNAを抽出し、マイクロアレイを用いmiRNAの発現を網羅的に解析した。この解析で対照に比べ大きな発現の差異を認めたmiRNAのうち、過去に「血管新生に関連性」が報告されているmiRNAを選別したところ、miR-140-3p・miR-140-5p・miR-126a-3p・miR-146a-5p・miR-27bが候補として挙げられた。
次いで、これらのmiRNAの発現量の挙動をreal-time PCRにて経時的に解析した。具体的には、骨折作成後5・7・11・14・21・28日の6つのtime pointsで骨折部の組織を採取し、miRNAを抽出し、real-time PCR解析を行った。
現在、real-time PCR解析が進行中であるが、「骨折治癒」「血管新生」に関連するmiRNAの候補として、miR-126a-3p・miR-146a-5p・miR-27bが有望視されている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
マイクロアレイおよびreal-time PCR解析の結果から、有望な「骨折治癒に重要な血管新生」に関連するmiRNAの候補がいくつか絞れてきたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成27年度の研究結果により選定された骨折治癒に重要な「血管新生に関連するmiRNA」に対応するanti-miRNA oligonucleotideをラット大腿骨偽関節モデルの偽関節部に移植し、偽関節の治癒・骨再生が起きるかを検討する。また、その過程における、分子細胞学的・組織学的・力学的検討を行う。
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| Causes of Carryover |
miRNA解析に用いる試薬費用（物品費）が想定より下回ったため
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
新たに発生した次年度使用額は、miRNA inhibitor等のin vivo実験の試薬に使用する予定である。
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[Presentation] Altered Expression of MicroRNAs during Fracture Healing in Diabetes Mellitus2016
Author(s)
Takahara S, Lee SY, Niikura T, Iwakura T, Waki T, Arakura M, Sakai Y, Kuroda R, Kurosaka M
Organizer
The 62nd Annual Meeting of Orthopaedic Research Society
Place of Presentation
Orlando, FL, USA
Year and Date
2016-03-05 – 2016-03-08
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