2015 Fiscal Year Research-status Report
関節形態形成におけるメカニカルストレス応答機序の分子生物学的解析
Project/Area Number |
15K10467
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Research Institution | Gifu University |
Principal Investigator |
瀧上 伊織 岐阜大学, 医学部附属病院, 講師 (90610410)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
秋山 治彦 岐阜大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60402830)
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Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | 骨・軟骨代謝学 / 関節軟骨 / メカニカルストレス |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、メカニカルストレス負荷と関節形態形成との関連を解明しようとするものである。われわれは、先天性股関節脱臼に着目し、その解析を目的としてラット新生児の股関節、膝関節を伸展位で10日間固定する方法により、股関節脱臼モデルラットを作製した。 肉眼所見、単純X線、CTにより、本ラットはヒトでみられる所見と同様に大腿骨頭の変形および寛骨臼の形成不全が認められることを確認した。 モデルラットの股関節組織を脱灰ののちにHE染色、サフラニンO-ファストグリーン染色を施行し、組織学的にも脱臼モデルでは骨頭の変形および寛骨臼の形成不全がみられることを確認した。脱臼モデルはコントロールラットに比してY軟骨および寛骨臼軟骨では軟骨細胞の数が減少し、細胞の配列の規則性が失われていた。さらに、免疫組織染色にて関節軟骨のタイプIIコラーゲンの染色が低下していることが判明した。これらは先天性股関節脱臼によるメカニカルストレスがない状態が関節形態形成に強く影響していることを示している。 今後はin situハイブリダイゼーション法を用いた組織学的解析を行う。GeneChip解析によりメカニカルストレス負荷がない状態における遺伝子発現プロファイリングを解析し軟骨におけるメカニカルストレス応答遺伝子の同定を行う。さらに得られた遺伝子発現プロファイリングの結果に基づき、関節形成におけるメカニカルストレス応答遺伝子の機能をin vitro、in vivoで解析することを計画している。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
股関節脱臼モデルラットの形態学的解析は終了しており、組織学的、免疫組織学的解析も順調に進行している。今後遺伝子発現プロファイリング、機能解析へとすすめていく予定である。
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Strategy for Future Research Activity |
今後はメカニカルストレス応答遺伝子の同定およびメカニカルストレス応答遺伝子の機能解析へと進めていく予定である。
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Causes of Carryover |
股関節脱臼モデルの作成が安定しており、レントゲン、CTによる構造解析、組織学的解析も順調に進行したため。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
組織学的、免疫組織学的解析をさらに進める予定である。 それと並行して、メカニカルストレス応答遺伝子の同定を計画している。その結果に基づき、関節形成におけるメカニカルストレス応答遺伝子の機能解析まですすめていく予定である。
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