光学異性ブピバカインのチャネル結合と開閉動態の解明 -局麻中毒治療の新戦略-

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K10511
• Research Institution: Shiga University of Medical Science
• Principal Investigator: 瀬戸 倫義 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (10335177)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 加藤 稔 立命館大学, 生命科学部, 教授 (00241258)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: bupivacaine / enantiomer / KcsA(E71A) / single channel

Outline of Annual Research Achievements

平面膜法によるKcsA単チャネルの計測の再現性条件を試行錯誤し、探索した。その結果、薄膜化速度を遅くすることで脂質膜の寿命をのばし、解析に十分な開閉事象を得ることができることが分かった。薄膜化速度は、隔壁の脱脂、溶液・脂質の異物除去、隔壁のプレコーティング、隔壁穴の形、隔壁穴の円滑さ、エッジの性状によって決まることがわかった。また、チャネル融合で多チャンネルが平面膜に取り込まれ、KcsA-KcsAの会合によってモードが変化するのではないかと考えられる。単チャネルの膜融合になるように、十分に薄いチャネル濃度での膜融合が必要だとわかった。またKcsA-KcsAの会合を抑制する物質を探索する方向も必要かと考えられる。
計算ワークステーションの整備をさらに進めた。3D表示のためのグラフィックカードを導入し、それにともない電源強化を行った。ソフトウエアMOE2018.0101の更新、計算ライセンスの更新をおこなった。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

膜寿命が短く、測定時間がとれない。チャネル濃度が高く単チャネルがえれない。
建物改修工事により平成29年２月－平成30年3月まで実験室が使えなかった。

Strategy for Future Research Activity

再構成膜ひ薄化速度を低下させ、膜寿命を延長し試料の安定化をはかる。
再構成膜へのチャネル融合の際、チャネル会合を避けるためにチャネル濃度をさげる。
再構成膜成分にチャネル会合を避ける物質を添加する。

Causes of Carryover

実験室が事実上使用できなかったことで、居室における計算機実験に重点を置いた。ひきつづきワークステーション強化を継続し、測定実験を再開する。