The analysis of prostate cancer exosome and the development of new urinary biomarker

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K10588
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 藤田 和利 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (50636181)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 野々村 祝夫 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (30263263) ; 植村 元秀 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座准教授 (40631015)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 前立腺癌 / エクソソーム / 尿中バイオマーカー

Outline of Annual Research Achievements

尿中エクソソームに着目し、プロテオミクスの手法を用いて高リスク前立腺癌の新規尿中バイオマーカーの探索を行った。前立腺生検陰性患者、予後良好前立腺癌患者（Gleason score 6）、予後不良前立腺癌患者（Gleason score 8-9）から得られた前立腺直腸診後の尿を用いて（各群6例）、尿中のエクソソームを超遠心法により抽出精製し、iTRAQ法を用いて標識し、高分解能質量分析計（LTQ Orbitrap Elite）で網羅的にタンパクの発現を比較したところ、尿中エクソソームより合計3520個のタンパクを同定した。これらのタンパクの中で、生検陰性群に比べ、前立腺癌群で有意に上昇しているタンパクを１１個認めた。これら複数のタンパクをバイオマーカー候補としてSRM/MRM法にて別コホートで検証したところ、FABP5が有意にGleason scoreと関連し、また生検陰性群に比べ前立腺癌患者において有意に高値を示した。ROC曲線解析ではFABP5の前立腺癌診断能および高リスク前立腺癌の予測能はともにPSAよりも良い結果であった。またFABP5以外にも、Granulin, AMBP, CHMP4A, CHMP4Cは高グリソン前立腺癌患者尿中のエクソソーム内で有意に上昇していた。前立腺癌に対して施行した前立腺全摘標本でFABP5の発現を免疫化学染色法にて検討したところ、高グリソンスコア前立腺癌でのFABP5の高発現を認めた。また、前立腺癌細胞株での検討でも、前立腺癌細胞株および、そのエクソソーム中にFABP5の発現を認め、前立腺癌の進展に重要な役割を果たしていることが示唆された。