2016 Fiscal Year Research-status Report
CRPCにおけるCAVEOLIN-１、２関連シグナル伝達を介した新規治療法の探索
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15K10597
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
賀本 敏行 宮崎大学, 医学部, 教授 (00281098)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉江 悟 宮崎大学, 医学部, その他 (50626140) [Withdrawn]
向井 尚一郎 宮崎大学, 医学部, 准教授 (10315369)
月野 浩昌 宮崎大学, 医学部, 講師 (60433059)
山崎 浩司 宮崎大学, 医学部, 医員 (30777355)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | caveolin / CRPC / 前立腺癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
臨床検体を用いた解析で、血漿Caveolin (Cav) 1 ,-2 levelはnon-CRPC群と比較してCRPC群で有意に増加していた（Cav-1: p=0.003/ Cav-2: p=0.002）。またcell lineにおいてもCav-1,-2はmRNAおよびprotein levelともにLNCaP(non-CRPC model)に比べてPC3(CRPC model)で有意に高発現していた(p<0.001)。さらに、PC3 Cav-1 ノックダウン(KD) 株ではそのco-factorと言われるCav-2の強い発現抑制を認め、かつこのCav-2をKDすると同じくCAV1の発現が強く抑制されるといった連動性も確認できた。
前立腺癌細胞株から抽出した蛋白とmRNAを用いた免疫ブロット及びPCRでは、PC3において他細胞株と比較しCav-1, -2の高発現を認めた。
siRNAによるPC3細胞におけるCav-1, -2のknockdownを行い、Cav-1, -2が十分knockdownされていることをreal time RT-PCRで確認した。さらにCav-1のknockdownでCav-2の発現が抑制され、同様にCav-2のknockdownによりCav-1の発現が抑制されていたことを再度確認した。Cav-1, -2をKDしたPC3を用いて、migration assayを行ったところ、controlと比べ有意に遊走能の低下を認めた。しかし、invasion assayではCav-1, -2のKDによる浸潤能の有意な変化はみられなかった。その要因を探るべくCav-1, -2のKDによるEMT関連分子の変化を解析した結果、Cav-1、2のKDによるE-cadherinの発現亢進がみられた。CaveolinのKDによる遊走能の変化に上皮間葉転換（EMT）現象が関与している可能性を考慮し、現在解析を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Cav-1, 2がPC3細胞における遊走能に関与しており、その作用はE-cadherinを介している可能性があることが判明した。Cav-2の発現と前立腺癌細胞の遊走能やEMTに関連した報告はまだなく、現在遊走能に影響を与えるその他の要因・分子について、またE-cadherinの発現に関与するSnailファミリーの発現、機能解析を進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
1．Cav-1, 2とEMTの関連について、それぞれのKD株におけるEMT関連分子の変化を解析する。2．Cav-1, 2の恒常的KD細胞を作成し、マウスモデルにおける解析を行う。
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