Development of new treatment strategy targeting CAVEOLIN-1 and 2 related signaling axis

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K10597
• Research Institution: University of Miyazaki
• Principal Investigator: 賀本 敏行 宮崎大学, 医学部, 教授 (00281098)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 杉江 悟 宮崎大学, 医学部, その他 (50626140) [Withdrawn] ; 向井 尚一郎 宮崎大学, 医学部, 准教授 (10315369) ; 月野 浩昌 宮崎大学, 医学部, 講師 (60433059) ; 山崎 浩司 宮崎大学, 医学部, 医員 (30777355)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: caveolin1 / caveolin2 / CRPC(去勢抵抗性前立腺癌)

Outline of Annual Research Achievements

患者血漿サンプルを去勢抵抗性前立腺癌（以下CRPC）36例、ホルモン感受性前立腺癌（non-CRPC）22例のtotal 58例から採取した（本学医の倫理委員会承認済：第847号）。得られた血漿サンプルを用いてCAV(caveolin)1,-2 levelを市販のELISA kitにて測定した。またそれぞれのcell lineからtotal RNAおよびタンパク質を抽出し、qRT-PCRおよびELISA法にて両分子の発現量をmRNAおよびprotein levelで検討した。さらにCAV1,-2特異的siRNAをCAV1,-2高発現株であるPC3に対して導入し、両分子のknock down(KD)を行いPC3 CAV1,-2 KD株とcontrol株との間でCAV関連分子に与える影響の差異をqRT-PCRおよびELISA法を用いて検討した。血漿CAV1 ,-2 levelはnon-CRPC群と比較してCRPC群で有意に増加していた（CAV1: p=0.003/ CAV2: p=0.002）。またcell lineにおいてもCAV1,-2はmRNAおよびprotein levelともにLNCaP(non-CRPC model)に比べてPC3(CRPC model)で有意に高発現していた(p<0.001)。CAV1特異的siRNAを用いてCAV1,-2高発現細胞株であるPC3に対して導入し、CAV1のknock downを行いcontrol株との間でそのco-factorと言われるCAV2などのCAV関連分子に及ぼす影響を検討した結果、PC3 CAV1 KD株においてCAV2の発現抑制を認め、かつ興味深いことにこのCAV2をKDすると（PC3 CAV2 KD株において）同じくCAV1の発現が抑制されるといった連動性が確認できた。
CAV1、CAV2のノックダウンにより、PC3細胞の遊走能は低下し、同細胞ではビメンチンとN-カドヘリンの発現が低下していた。さらに、PCRアレイによる解析で、MMP13とETS variant 4の関与が考えられた。