体細胞変異に着目したアルドステロン産生細胞クラスターの病変進展メカニズムの解明

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K10650
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 西本 紘嗣郎 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (00365363)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小坂 威雄 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (30445407) ; 沖 健司 広島大学, 大学病院, その他 (30638995) ; 向井 邦晃 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (80229913)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: アルドステロン / 次世代シーケンサー

Outline of Annual Research Achievements

我々は、アルドステロン(ALDO)合成酵素(CYP11B2)を検出する免疫染色に成功し、成人正常副腎皮質にCYP11B2を強発現するALDO産生細胞塊(APCC)を同定した (JCEM　2010;95,2296-305)。さらに最近我々は、APCCからの微量DNAの解析により、ALDO産生腺腫(APA)に報告されたイオンチャネル・ポンプ遺伝子の体細胞変異(APA関連変異)がAPCCにも存在することを報告した(PNAS 2015;112,E4591-9)。以上は、APCCがAPAの発生母地であるという我々の仮説を支持する。しかしAPCCからAPAへの移行を示唆する病変(possible APCC to APA transitional lesion: pAATL)は報告されていなかった。そこで、本課題ではpAATLを検出してそれらにおけるAPA関連変異の局在を明らかにすることを目的とした。原発性ALDO症(PA)の診断で副腎摘除術を行ったが、病理学的にAPAが検出されなかった十数例の副腎からpAATLを探索し、検出されたpAATLからAPA関連変異解析を行った。その結果、2例の副腎にCYP11B2陽性多発結節を認めた。これらは被膜直下がAPCC様でありその内奥部は微小APA様であったことからpAATLと推定した。6個のpAATLからAPA関連変異解析を行い3個のpAATLにAPA関連変異を認めた。2個の変異陽性pAATLではAPA様部位のみに変異を認めたが、それらのAPCC様部位には認めなかった。この結果は、APA関連変異がAPA形成に関与する可能性を示す。残りの変異陽性pAATLではAPCC様部位とAPA様部位に共通する変異を認めた。これは、APCC様部位とAPA様部位が単一細胞由来であることを示す。pAATLにおけるAPA関連変異の局在は、同変異がAPCCからのAPA発生に関与する可能性を示唆する。本研究成果はJCEM 2016;101,6-9に掲載された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本研究課題では、2点の目的 (目的1と2) を提案した。目的1の研究は、「研究実績の概要」に記載したように、ほとんど達成することができた。現在、目的2の研究を遂行するために準備中である。以上のように、研究はおおむね順調に進展している。

Strategy for Future Research Activity

目的2の研究では、「ラット副腎においてAPA関連変異はAPCCを形成する」ことを検証する。レンチウイルスを用いてAPA関連変異遺伝子をラット副腎に強制発現させる予定である。申請者は、共同研究者である広島大学の沖博士と共同でレンチウイルスを作製し、すでに同ウイルスが副腎皮質癌細胞株であるHAC15細胞において機能することを確認している。今後は、ラット副腎に同レンチウイルスを局注し、解析を進める予定である。

Causes of Carryover

平成27年度は、経費削減に務めたために残額が生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

目的2の研究では、レンチウイルスの作製およびラットの購入や飼育に予定より高額の資金が必要になる予定である。平成27年度の残額はその研究資金に充てる。

Research Products

• [Journal Article] A case of severe rectal hemorrhage possibly caused by radiation recall from gemcitabine. (2016)
  • Author(s): Koshiro Nishimoto, Yushi Akise, Masaharu Miyazawa, Shoji Kutsuki, Subaru Hashimoto, Atsushi Uchida.
  • Journal Title: Keio J Med Volume: 65 Pages: 16 - 20
  • DOI: 10.2302/kjm.2014-0015-CR
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A case report: Nodule development from subcapsular aldosterone-producing cell clusters causes hyperaldosteronism (2016)
  • Author(s): Nishimoto K, Seki T, Kurihara I, Yokota K, Omura M, Nishikawa T, Shibata H, Kosaka T, Oya M, Suematsu M, Mukai K
  • Journal Title: J Clin Endocrinol Metab Volume: 101 Pages: 6 - 9
  • DOI: 10.1210/jc.2015-3285
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] A Case of Pancreatic Side Effects Resulting from Sorafenib and Axitinib Treatment of Stage IV Renal Cell Carcinoma (2015)
  • Author(s): Kitamura Y, Yoshii H, Nishimoto K, Shinchi Y, Tokonabe S, Takao M, Daido Y
  • Journal Title: Keio J Med Volume: 64 Pages: 62 - 64
  • DOI: 10.2302/kjm.2015-0001-CR
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A Novel Somatic Deletion Mutation of ATP2B3 in Aldosterone-Producing Adenoma (2015)
  • Author(s): Murakami M, Yoshimoto T, Minami I, Bouchi R, Tsuchiya K, Hashimoto K, Izumiyama H, Fujii Y, Endo T, Akashi T, Nishimoto K, Mukai K, Kihara K, Ogawa Y
  • Journal Title: Endocr Pathol Volume: 26 Pages: 328 - 33
  • DOI: 10.1007/s12022-015-9400-9
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Potassium channels related to primary aldosteronism: Expression similarities and differences between human and rat adrenals (2015)
  • Author(s): Chen AX, Nishimoto K, Nanba K, Rainey WE
  • Journal Title: Mol Cell Endocrinol Volume: 417 Pages: 141 - 8
  • DOI: 10.1016/j.mce.2015.09.011
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Aldosterone-stimulating somatic gene mutations are common in normal adrenal glands (2015)
  • Author(s): Nishimoto K, Tomlins SA, Kuick R, Cani AK, Giordano TJ, Hovelson DH, Liu CJ, Sanjanwala AR, Edwards MA, Gomez-Sanchez CE, Nanba K, Rainey WE
  • Journal Title: Proc Natl Acad Sci U S A Volume: 112 Pages: E4591 - 9
  • DOI: 10.1073/pnas.1505529112
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Bone Morphogenetic Protein-4 (BMP4): A Paracrine Regulator of Human Adrenal C19 Steroid Synthesis (2015)
  • Author(s): Rege J, Nishimoto HK, Nishimoto K, Rodgers RJ, Auchus RJ, Rainey WE
  • Journal Title: Endocrinology Volume: 156 Pages: 2530 - 40
  • DOI: 10.1210/en.2014-1942
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] アルドステロン合成酵素の免疫組織化学による新しい副腎組織病理学 (2015)
  • Author(s): 西本 紘嗣郎、北村 陽典、中川 健、関 次男、小坂 威雄、大家 基嗣、向井 邦晃
  • Journal Title: 日本内分泌・甲状腺外科学会雑誌 Volume: 32 Pages: 230 - 233
  • Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] A novel pathology related to subcapsular aldosterone-producing cell clusters causes hyperaldosteronism (2016)
  • Author(s): Koshiro Nishimoto, Tsugio Seki, Isao Kurihara, Kenichi Yokota, Masao Omura, Tetsuo Nishikawa
  • Organizer: AUA 2016
  • Place of Presentation: San Diego (USA)
  • Year and Date: 2016-05-06 – 2016-05-10
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] A case report: Nodule development from subcapsular aldosterone-producing cell clusters causes hyperaldosteronism (2016)
  • Author(s): Koshiro Nishimoto, Tsugio Seki, Isao Kurihara, Kenichi Yokota, Masao Omura, Tetsuo Nishikawa, Hirotaka Shibata, Takeo Kosaka, Mototsugu Oya, Makoto Suematsu, Kuniaki Mukai
  • Organizer: ENDO 2016
  • Place of Presentation: Boston (USA)
  • Year and Date: 2016-04-01 – 2016-04-01
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] A NOVEL TYPE OF JUVENILE PRIMARY ALDOSTERONISM DUE TO A KCNJ5 SOMATIC MUTATION THAT PRESUMABLY OCCURRED IN AN ADRENOCORTICAL PRECURSOR CELL (2016)
  • Author(s): Ai Tamura, Koshiro Nishimoto, Tsugio Seki et al.
  • Organizer: Conference on the Adrenal Cortex 2016
  • Place of Presentation: Boston (USA)
  • Year and Date: 2016-03-29 – 2016-03-31
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] POSSIBLE INVOLVEMENT OF A NOVEL INTERMEDIATE LESION BETWEEN APCC AND APA IN A PRIMARY HYPERALDOSTERONISM PATIENT (2016)
  • Author(s): Minae Koga, Koshiro Nishimoto, Tsugio Seki, Kuniaki Mukai, Makoto Suematsu, Takeo Kosaka, Mototsugu Oya, Kohzoh Makita, Seishi Matsui, Yuya Tsurutani, Yoko Matsuzawa, Jun Saito, Masao Omura, Tetsuo Nishikawa
  • Organizer: Conference on the Adrenal Cortex 2016
  • Place of Presentation: Boston (USA)
  • Year and Date: 2016-03-29 – 2016-03-31
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] アルドステロン産生細胞クラスターからアルドステロン産生腺腫への移行を示唆する新規病変の同定とその体細胞遺伝子変異解析 (2016)
  • Author(s): 西本紘嗣郎、関 次男、栗原 勲、横田 健一、大村 昌夫、西川 哲男、柴田 洋孝、小坂 威雄、大家 基嗣、末松 誠、向井 邦晃
  • Organizer: 第3回PA・Aldosterone関連疾患研究会
  • Place of Presentation: フクラシア東京ステーション (東京都千代田区)
  • Year and Date: 2016-02-06 – 2016-02-06