2015 Fiscal Year Research-status Report
血清microRNAプロファイルに基づく侵入奇胎の早期診断法確立・成立機序の解明
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15K10703
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
碓井 宏和 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (90375634)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 絨毛性疾患 / 血清マーカー / miRNA / セルフリー核酸 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、侵入奇胎の腫瘍マーカーとして有用性のある血清miRNA（miRNAプロファイル）を同定することを目的とする。また、同時に、侵入奇胎の発症機序の解明に近づくことを目指す。
侵入奇胎は、主に雄核発生奇胎後に発症する。転移する場所が、子宮筋層・肺に限られること、hCGを産生すること、主に子宮内容除去術終了後2～8週間に発症することなど、均一した性質を有する。
本研究の最大のコンセプトは、侵入奇胎発症時の奇胎組織の特徴を捕まえることにある。このため、従来から進めてきた子宮内容組織（胞状奇胎組織）の直接の解析ではなく、侵入奇胎成立時の、血清miRNAを研究対象とした。
侵入奇胎および胞状奇胎患者の血清中から、既報通りmiRNAが抽出できるか検証した。コントロール血清4例と侵入奇胎例2例、胞状奇胎例2例に対して、EXIQON社のmiRCURY RNA Isolation Kitを用いて、miRNAの抽出を行った。血清miRNAが抽出されていることを、hsa-miR-23a-3p（血清・血漿中で最も安定発現していることが知られている）の増幅により確認した。雄核発生奇胎組織で高発現しており、血清中にもセルフリー核酸として存在することが報告されている第19番染色体上のC19MC cluster上のmiRNAであるhsa-miR-517a-3p, hsa-miR-520bの増幅を、侵入奇胎および胞状奇胎患者の血清miRNAをテンプレートとして検証した。胞状奇胎の子宮内容除去術前の血清では、全2例で増幅を確認したが、侵入奇胎例では、1例で増幅を確認、1例では、増幅が確認できなかった。コントロール血清全4例で、hsa-miR-517a-3p, hsa-miR-520bの増幅は確認できなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
対象疾患・コントロールの血清から、セルフリーmiRNAが十分量回収されていることは、確認できた。しかしながら、侵入奇胎・胞状奇胎由来miRNAの含量の評価が当初は、十分にできなかった。このため、当初予定されていたmiRNAアレイ解析まで、実験を進めることができなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
雄核発生胞状奇胎で発現が多い父性発現miRNAであるhsa-miR-517a-3p, hsa-miR-520bを侵入奇胎・胞状奇胎由来miRNAの指標とした。これらのmiRNAが、奇胎組織中に多く存在することは確認した。また、侵入奇胎・胞状奇胎セルフリーmiRNAをテンプレートとした場合にも、増幅することができる症例があることは確認できた。
本年は、当初の予定通り、回収された血清miRNAを用いて、アレイ解析を行い、侵入奇胎例および侵入奇胎にならなかった胞状奇胎、および非妊娠コントロールでmiRNAプロファイルのの比較を行う予定である。侵入奇胎になった症例で特異的なmiRNAの抽出を目指す。見つかったmiRNAに対しては、血清miRNAに対して、個別にバリデーションまでを行う予定である。
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| Causes of Carryover |
残額が少額であり、適切な購入物品がなかったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成28年度予算として、消耗品の購入に充てる。
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Research Products
(13 results)
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[Journal Article] The tumor-suppressive microRNA-1/133a cluster targets PDE7A and inhibits cancer cell migration and invasion in endometrial cancer2015
Author(s)
Yamamoto N, Nishikawa R, Chiyomaru T, Goto Y, Fukumoto I, Usui H, Mitsuhashi A, Enokida H, Nakagawa M, Shozu M, and Seki N
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Journal Title
Int J Oncol
Volume: 47
Pages: 325-334
DOI
Peer Reviewed
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