2015 Fiscal Year Research-status Report
幅広い型のHPVを標的とする粘膜ワクチン及び受動免疫ワクチンの開発
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15K10740
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
森 清一郎 国立感染症研究所, その他部局等, 研究員 (80342898)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | HPVワクチン / 交叉性中和抗体 / キメラ抗体 / AAVベクター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒトパピローマウイルス（HPV）の感染予防にワクチンが導入されているが、子宮頸癌や尖圭コンジローマの原因となるHPVのうち4つの型にしか効果がない。癌の原因となるHPVには少なくとも15の型があり、全ての発癌性HPVに有効なワクチンが必要である。本研究は、発癌性HPVに共通する交叉性中和エピトープや交叉性中和抗体を利用して、幅広い型のHPVに有効な次世代ワクチンの開発を目指す。
本年度は、アデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターを用いて生体内で抗HPV交叉性中和抗体を安定して発現させることにより幅広い型のHPV感染を防ぐことを目的とした受動免疫ワクチンの開発を行なった。ヒトでの使用を念頭に、マウス由来の抗HPV交叉性中和抗体の可変領域とヒトIgG定常領域を融合したキメラ抗体をデザインした。細胞外分泌シグナルを付加したキメラ抗体の重鎖と軽鎖遺伝子をプロテアーゼ認識配列を挟んで融合した人工遺伝子を作成した。培養細胞に導入し、培養上清からキメラ抗体を分離精製した。キメラ抗体は、調べた8つの発癌性HPVを全て中和したことから、中和活性と交叉性を維持していることがわかった。続いて、上記キメラ抗体遺伝子をAAV ITR配列に挟んだベクタープラスミドとAAVキャプシド蛋白質発現プラスミドを培養細胞に導入し、キメラ抗体遺伝子をパッケージしたAAVベクターを作成した。精製したキメラ抗体発現AAVベクターをマウス前脛骨筋に接種し、経時的に採血した。ベクター接種3ヶ月後、血清中に最大約100μg/mlのキメラ抗体が分泌されていることをELISAにより確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の計画では、交叉性中和エピトープを抗原とする粘膜ワクチンと交叉性中和抗体を利用した受動免疫ワクチンの開発を平行して進める予定であったが、時間を要すると思われた交叉性中和抗体発現AAVベクターの作成が順調に進んだため、受動免疫ワクチンの開発を先に行なった。その結果、計画では2年目以降に行う予定であったAAVベクターのマウスへの接種を初年度に行うことができた。その分、粘膜ワクチンの開発が遅れているが、全体としてはおおむね順調に進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
キメラ抗体発現AAVベクターを接種したマウスを用いて、受動免疫ワクチンの有効性を評価する。レポータ遺伝子をもつ各型のHPVキャプシドをマウスの膣内に接種し、レポーター遺伝子の発現を測定することにより感染防御効果を調べる。また、HPV交叉性中和エピトープをAAV粒子表面に提示する抗原を作成し、経鼻接種可能な粘膜ワクチンの開発を進める。
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| Causes of Carryover |
年度末納品等にかかる支払いが平成28年4月1日以降となったため、当該支出分については次年度の実支出額に計上予定。平成27年度分についてはほぼ使用済みである。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
上記のとおり。
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