2017 Fiscal Year Annual Research Report
Cochlear supporting cells as a target of cochlear pathology and regenerative medicine
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15K10749
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
山本 典生 京都大学, 医学研究科, 講師 (70378644)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中川 隆之 京都大学, 医学研究科, 講師 (50335270)
坂本 達則 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第5研究部, 研究員 (60425626)
岡野 高之 京都大学, 医学研究科, 助教 (60642931)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 内耳 / 網羅的遺伝子解析 / IGF1 / Netrin1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
発生期内耳蝸牛単一細胞の網羅的遺伝子発現解析
胎生期13日目の81個のマウス蝸牛単一細胞由来のRNA抽出・増幅サンプルを用いてRT-PCRを行い、感覚上皮予定領域マーカーであるSox2の発現の有無を検定した。Sox2陽性サンプルは47個、陰性サンプルは34個であった。これらをマイクロアレイにかけて網羅的遺伝子発現情報を得た。
Sox2陰性細胞からの34サンプルすべてで発現していない遺伝子プローブは14424個であった。これらのプローブの遺伝子はSox2陽性細胞にのみ発現しているものと仮定することができる。このうちSox2陽性細胞の一部にのみ発現する遺伝子を同定するためまず、Sox2陽性細胞由来47サンプルのうち1サンプル以上で発現量（発現シグナル値の対数）が4以上のプローブを2520個同定した。そのうち6個以上のサンプルで発現量が6以上のプローブは28個であった。28のプローブが示す遺伝子のSox2陽性領域での発現の有無をIn situ hybridizationを用いて確認中で、少なくとも1つの遺伝子で、Sox2陽性領域の一部に発現を確認できた。
IGF1の支持細胞を介した有毛細胞保護
アミノグリコシド障害後の内耳蝸牛において、IGF1により発現上昇するNetrin1が内耳蝸牛有毛細胞を保護するメカニズムの検討を行った。Netrin1は、アミノグリコシド障害時にIGF1を投与した際にのみ支持細胞に発現していた。またNetrin1受容体のうち、Unc5Bのみが新生仔マウス蝸牛全長にわたって有毛細胞に発現していた。さらに、IGF1やNetrin1による蝸牛有毛細胞保護効果がUnc5B阻害により減弱されることを示し、IGF1により支持細胞に発現したNetrin1がUnc5Bを介して有毛細胞保護を行っていると考えられた。これらの成果をNeuropharmacology誌に発表した。
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