ムチン16の常在細菌と点眼防腐剤に対する眼表面炎症制御での役割の解明

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K10877
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 白井 久美 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (70326370)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 雑賀 司珠也 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (40254544) ; 岡田 由香 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (50264891)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: Muc16 / 点眼防腐剤 / 眼表面炎症

Outline of Annual Research Achievements

Muc16ノックアウトマウスと野生型マウスで、防腐剤成分である0.02% 塩化ベンザルコニウム（BAC） 5 μlを１日2回、2週間点眼し、屠殺・眼球摘出した。新鮮凍結ブロックを作成し、炎症性シグナル伝達因子Stat3の免疫染色を行ったが、陽性所見はみられなかった。
Muc16ノックアウトマウスと野生型マウスで、防腐剤成分である0.02% 塩化ベンザルコニウム（BAC） 5 μlを１日2回、2週間点眼し、屠殺・眼球摘出した。結膜組織、角膜組織を摘出。mRNAを抽出し、Muc1、Muc4、Muc5ACの mRNAの発現量をTaqMan real-time RT-PCRで測定した。Muc16欠失マウスと野生型マウスで、Muc1、Muc4、Muc5ACの mRNAの発現量に有意差はみられなかった。
培養初代ヒト角膜上皮細胞およびSV40不死化培養ヒト角膜上皮細胞(Araki-Sasaki ヒト角膜上皮株)において、0.02% BAC添加群と非添加群を作成し、48時間後に、MUC16、MUC1、MUC4の mRNAの発現に差がみられるか、TaqMan real-time RT-PCRで検討した。培養初代ヒト角膜上皮細胞およびSV40不死化培養ヒト角膜上皮細胞(Araki-Sasaki ヒト角膜上皮株)のどちらも、0.02% BAC添加群では非添加群よりもMUC16、MUC1、MUC4の mRNAの発現量はやや少ないが、有意差はみられなかった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

Muc16ノックアウトマウスの繁殖状況より、使用可能な匹数が限定されるため

Strategy for Future Research Activity

Muc16欠損によるToll-like receptor (TLR)系の活性化への影響の有無について調べる。

Causes of Carryover

納入期限が間に合わなかったため

Expenditure Plan for Carryover Budget

物品購入費用として使用予定