2017 Fiscal Year Annual Research Report
Functional role of PPP3CB in neuroblastoma and potential anti-tumor effect of calcineurin inhibitor on neuroblastoma
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15K10933
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| Research Institution | 地方独立行政法人佐賀県医療センター好生館(ライフサイエンス研究所) |
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Principal Investigator |
李 元元 地方独立行政法人佐賀県医療センター好生館(ライフサイエンス研究所), ライフサイエンス研究所, 研究員 (00392259)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中川原 章 地方独立行政法人佐賀県医療センター好生館(ライフサイエンス研究所), ライフサイエンス研究所, 理事長 (50117181)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 神経芽腫 / ＰＰＰ３ＣＢ / calcineurin inhibitor |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はこれまでに、野生型PPP3CBの発現亢進または恒常活性型PPP3CB変異体がNFAT経路を活性化することによって、神経芽腫細胞増殖を促進することを明らかにし、さらに、NFATの新たな標的遺伝子として、MYCNとβ-Cateninを同定した。本年度は、Calcineurin阻害剤によるPPP3CBシグナリングへの抑制とその神経芽腫への抗腫瘍効果を検討した。
まず、臨床に使用されているCalcineurin阻害剤Cyclosporin A (CsA)とFK506を用いて、神経芽腫由来のMYCN遺伝子増幅細胞株と非増幅細胞株への細胞増殖抑制効果および細胞死誘導効果を調べた。MTTアッセイとトリパンブルー色素排除試験法にて検討したところ、二種類の阻害剤は共に神経芽腫細胞株に対して時間および濃度依存性に細胞増殖を抑えることを明らかにした。また、フローサイトメトリー解析を行ったところ、上記の阻害剤処理は神経芽腫細胞株において、時間および濃度依存性にプログラム細胞死を引き起こすことが判明した。さらに、Calcineurin阻害剤で処理した細胞には、NFAT2とNFAT4の活性化が抑えられ、PPP3CBの発現がタンパク質レベルで、NFATの標的遺伝子c-Myc、MYCNとβ-Cateninの発現がmRNAレベルとタンパク質レベルの両方で減少した。これらの研究結果はCalcineurin阻害剤がPPP3CBの発現と活性を抑えることによってNFATの標的遺伝子の発現を抑制し、神経芽腫に対して抗腫瘍効果を発揮することを示し、PPP3CBを含むCalcineurinの活性阻害が高リスク神経芽腫への有効な治療法の一つとなる可能性が示唆された。
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[Journal Article] Neuroblastoma2018
Author(s)
Nakagawara A, Li Y, Izumi H, Muramori K, Inada H, Nishi M.
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Journal Title
Jpn J Clin Oncol
Volume: 48
Pages: 214-241
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Genomic analysis-integrated whole-exome sequencing of neuroblastomas identifies genetic mutations in axon guidance pathway2017
Author(s)
Li Y, Ohira M, Zhou Y, Xiong T, Luo W, Yang C, Li X, Gao Z, Zhou R, Nakamura Y, Kamijo T, Kaneko Y, Taketani T, Ueyama J, Tajiri T, Zhang H, Wang J, Yang H, Yin Y, Nakagawara A.
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Journal Title
Oncotarget
Volume: 8
Pages: 56684-56697
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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