2016 Fiscal Year Research-status Report

知覚異常や疼痛が皮膚の創傷治癒におよぼす影響

Research Project

Project/Area Number	15K10947
Research Institution	Kitasato University
Principal Investigator	武田啓北里大学, 医学部, 教授 (20197297)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	内沼栄樹北里大学, 医学部, 名誉教授 (90146465)
Project Period (FY)	2015-04-01 – 2018-03-31
Keywords	創傷治癒 / 知覚 / 神経 / サブスタンスP
Outline of Annual Research Achievements	創傷治癒過程においては、知覚神経活動がどのように関わっているのか？痛み-慢性痛は創傷治癒を遷延させる因子なのか？あるいは早期の創傷治癒のためには痛みを伴うことが重要なのか？この視点で行われた研究はなかった。本研究の目的は体表の知覚異常や慢性疼痛が皮膚の創傷治癒に及ぼす影響を、神経因子の動態を評価することで明らかにすることである。また、がんの痛みに限らず、痛みの放置はさらに痛みを招来することから早期の疼痛緩和ケアが推進されている。創傷における痛みはがんとは違ったものではあるが、早期からの痛み解放を目的とする意味では同類である。創傷の知覚異常が治癒課程にどのように関わるかという課題に取り組むことは、ひいては傷をいかに早くきれいに治すかという臨床の課題を解決していく点において意義があると考えている。ラット脊髄後根切断による脱神経モデルをもちいて、痛みと創傷治癒との関連を検討してきた。組織学的な評価を行った実験系においては痛みのない領域では皮膚の創傷治癒が遷延した。知覚障害動物モデルについてはラットのTh8-12の肋間神経の切離を行い背部に知覚障害領域を作成した。動物モデルでは安定した作成条件を得た。平成28年度は動物実験の個体を増やして解析を行った。7日目の創傷部位の組織を採取しHE染色組織標本から計測を行い上皮化率、収縮率を算定した。HGF、ｂ－FGF、Substance-P、VEGF、CGRP、Flt,NCAM,PGP9.5など約10種類の創傷治癒関連因子の各遺伝子の創傷部における発現変動をRealtime-PCRで評価した。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason ラット脊髄後根切断による脱神経モデルを作成し、痛みと創傷治癒との関連を検討してきた。（医学部動物実験委員会承認）。組織学的な評価を行った実験系においては痛みのない領域では皮膚の創傷治癒が遷延した。知覚障害動物モデルについてはラットのTh8-12の肋間神経の切離を行い背部に知覚障害領域を作成した。動物モデルでは安定した作成条件を得た。本年度は動物実験の個体を増やして解析を行った。7日目の創傷部位の組織を採取しHE染色組織標本から計測を行い上皮化率、収縮率を算定した。HGF、ｂ－FGF、Substance-P、VEGF、CGRP、Flt,NCAM,PGP9.5など約10種類の創傷治癒関連因子の各遺伝子の創傷部における発現変動をRealtime-PCRで評価した。一部免疫染色で行えていないものがあるが、RT-PCRでの解析は項目を追加して行うことができた。順調に進展と判断している。
Strategy for Future Research Activity	本研究では、知覚神経異常の存在下では皮膚創傷の治癒が遅延しているのではないかという仮説を検証している。創傷治癒の評価はこれまでに私たちが報告した皮膚全層欠損創に対する創傷治癒評価法を用いている。治癒過程は、標本から創収縮率、ならびに上皮化率を定量化することで、創傷が治癒に至る経過を経時的に評価できる。また組織学的には、さらに炎症細胞浸潤の定量をおこなうことで評価する。さらに創傷の局所での痛みに関与する神経ペプチド、特に創傷治癒にも関連することが報告されている成長因子、神経因子の動態について解析する。
Causes of Carryover	動物実験の追加は行うことができた。得られた資料の解析を行っている。RT-PCRなどの追試を予定しているがこれらについてまだ行えていない。次年度で得られた最終的な資料の組織学的、生化学的解析を行う予定としている。
Expenditure Plan for Carryover Budget	動物実験の追試験に使用する。これまで得られた組織の解析や統計学的処理に必要な試薬、解析ソフトの購入を計画している。消耗品である神経剥離の際の微細手術器具の補充に充てる予定である。また次年度で研究成果の発表と論文作成にかかる費用に使用する予定である。