2015 Fiscal Year Research-status Report
自家ラット臼歯歯髄幹細胞を用いた歯髄組織再生法の確立
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15K11110
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
金子 友厚 新潟大学, 医歯学総合病院, 助教 (70345297)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 歯髄幹細胞 / 血管内皮細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究実績１：ラット下顎臼歯歯髄幹細胞および歯血管内皮細胞の単離・培養系の確立
実験動物として雌性Wistarラットを用いた。両側の下顎臼歯を抜歯後、歯根膜細胞を溶解して除去した。歯冠をスライサーにて水平切断し、冠部歯髄を表出させた後、細胞分散液を用いて歯髄組織の細胞を分離・分散した。その後、pericyteマーカーであるCD146(MCAM)抗体、さらにMAP1B抗体と反応させたダイナビーズ（Daynal社）を用いた磁気分離法により、ラット下顎臼歯歯髄幹細胞（CD146+MAP1B+細胞）およびラット下顎臼歯血管内皮細胞（CD146+MAP1B-細胞）の分離を行った。分離した細胞を、培養・増殖し、凍結保存した。
研究実績２：培養条件の設定
速やかに培養増殖させるための歯髄幹細胞および血管内皮細胞の培養条件の設定を行った。
主な業績: FDI 2015 Annual World Dental Congressにおいて演題『Effects of lipopolysaccharide-stimulation on CD146 and MAP1B mRNA expression in dental pulp stem cells.』がBest poster award 受賞を受賞した。日本歯科保存学会2015年度春季学術大会(第142回)において演題『ラット臼歯における幹細胞混合三次元スキャホールドを用いた歯髄再生』が優秀ポスター賞を受賞した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ほぼ実験計画書通りに研究が実施されたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでの我々の研究から、PLLA/ペプチドハイドロゲル混合型3次元スキャホールドとラット間葉系幹細胞をラット臼歯に移植すると、１～2週間でスキャホールド移植部が歯髄様組織で満たされることが分かっている。そこで、上記の培養方法(2)で得られた初代培養のCD146+MAP1B+ラット下顎臼歯歯髄幹細胞を、PLLA/ペプチドハイドロゲル混合型3次元スキャホールドとともに、根部歯髄を残し冠部歯髄のみを除去したラット上顎臼歯へ移植し、歯髄の再生が誘導可能かどうかを、1～2週間の動物埋植実験により検証する。
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| Causes of Carryover |
投稿中のオンラインジャーナル２本分の投稿料を確保していたため、次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
上述のオンラインジャーナルの投稿料に、この次年度使用額を合わせて、使用する予定。
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