Saliva as a potential tool for diagnosis and severity classification of dry mouth including Sjogren's syndrome.

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K11256
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 大山 恵子 九州大学, 大学病院, 学術研究員 (60740719)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 森山 雅文 九州大学, 歯学研究院, 助教 (20452774) ; 中村 誠司 九州大学, 歯学研究院, 教授 (60189040)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: シェーグレン症候群 / 唾液 / サイトカイン / TLR8

Outline of Annual Research Achievements

シェーグレン症候群(SS)患者および健常者それぞれ3例の口唇腺を用いたDNAマイクロアレイ、そして症例数を増やしたValidation の結果、Toll様受容体(TLR)ファミリーの１つであるTLR8 のみmRNA 発現が有意に亢進していた(P＜0.05)。TLR8は樹状細胞や単球/マクロファージ、B細胞に発現し、ウイルスや自己のRNAを認識して自然免疫に寄与し、自己免疫疾患の病態にも関与することが知られている。そこで、これらの発現候補細胞マーカー(樹状細胞:CD123、CD11c、単球/マクロファージ:CD68、B細胞:CD20)で蛍光二重免疫染色を行い、各細胞のTLR8陽性率を半定量的に解析したところ、SSの口唇腺における主なTLR８発現細胞は単球/マクロファージであった。
さらに、TLR８+ 単球/マクロファージの機能解析を目的に、ヒト単球細胞株(U-937)にTLR8を過剰発現もしくはノックアウトさせ、TLR8アゴニスト(R848)で刺激実験を行い、炎症性サイトカインであるTNF-αの産生能を検討した。その結果、アゴニスト無刺激群では、いずれの細胞株でもTNF-αの産生は認めなかった。一方、アゴニスト刺激群では、TLR8を過剰発現させた細胞株で有意にTNF-α の産生が亢進し、ノックアウトさせた細胞株では産生能は著明に低下した。
以上より、唾液腺に浸潤するTLR８+ 単球/マクロファージがTLR8刺激を介してTNF-αを産生し、Th1 誘導型炎症を引き起こし、唾液腺の破壊やアポトーシスを促進させることが示唆された。
今後は、TLR8トランスジェニックマウス(東京大学医科学研究所との共同研究)を用いてTLR８を介したSSの発症機序の解明し、SSの新規診断マーカーとしてTLR8の有用性の検証(特に患者唾液に着目して)を行う予定である。

Research Products

• [Presentation] IgG4 関連涙腺・唾液腺炎の診断における口唇腺生検および超音波検査の有用性 (2019)
  • Author(s): 坂本 瑞樹、森山 雅文、清水 真弓、鎮守 晃、望月 敬太、宗村 龍佑、大山 恵子、前原 隆、緒方 謙一、太田 美穂、山内 昌樹、石黒 乃理子、松村 万由、中村 誠司
  • Organizer: 第１１回 IgG４研究会
• [Presentation] CD68+ monocyte/macrophage via TLR8/TNF-α signaling contributes to the pathogenesis of Sjogren’s syndrome (2019)
  • Author(s): Mizuki SAKAMOTO, Masafumi MORIYAMA, Keiko OYAMA, Takashi MAEHARA, Kenichi OGATA, Miho OHTA, Noriko ISHIGURO, Haque A. S. M. RAFIUL, Akira CHINJU, Keita MOCHIZUKI, Mayu MATSUMURA, Ryusuke MUNEMURA, and Seiji NAKAMURA
  • Organizer: The 60th Congress of Korean Association of Oral & Maxillofacial Surgeons
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] M3型ムスカリン受容体アゴニストの長期投与による唾液分泌量の経時的変化と治療効果に関わる因子についての検討 (2019)
  • Author(s): 坂本瑞樹、森山雅文、林田淳之介、大山恵子、前原隆、緒方謙一、石黒乃理子、松村万由、鎮守晃、望月敬太、宗村龍祐、太田美穂、中村誠司
  • Organizer: 第73回 口腔科学会学術集会
• [Presentation] IgG4 関連疾患患者の口唇腺組織における臨床病態学的検討 (2018)
  • Author(s): 坂本 瑞樹、森山 雅文、大山 恵子、田中 昭彦、前原 隆、緒方 謙一、古川 祥子、太田 美穂、山内 昌樹、石黒 乃理子、Haque A. S. M. Rafiul、松村 万由、鎮守 晃、望月 敬太、林田 淳之介、中村 誠司
  • Organizer: 第 11 回 IgG4 研究会
• [Presentation] DNA microarray analysis of labial salivary gland in Sjogren’s syndrome indicates a role for innate immune responses in its pathogenesis via Toll like receptor 8. (2018)
  • Author(s): Mizuki Sakamoto, Masafumi Moriyama, Keiko Oyama, Akihiko Tanaka, Takashi Maehara,、Sachiko Furukawa, Miho Ohta, Masaki Yamauchi, Noriko Ishiguro, Miho Ohta, Masaki Yamauchi, Haque A. S. M. Rafiul, Akira Chinju, Keita Mochizuki, Ryusuke Munemura Jun-Nosuke Hayashida, and Seiji Nakamura.
  • Organizer: 第14回国際シェーグレン症候郡学会
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Involvement of innate immune responses in the pathogenesis of Sjogren’s syndrome via Toll like receptor 8 (2018)
  • Author(s): Mizuki SAKAMOTO, Masafumi MORIYAMA, Keiko OYAMA, Akihiko TANAKA, Takashi MAEHARA, Kenichi OGATA, Sachiko FURUKAWA, Miho OHTA, Masaki YAMAUCHI, Noriko ISHIGURO, Haque A. S. M. RAFIUL, Akira CHINJU, Keita MOCHIZUKI, Mayu MATSUMURA, Ryusuke MUNEMURA, Jun-Nosuke HAYASHIDA, and Seiji NAKAMURA
  • Organizer: The 59th Congress of Korean Association of Oral & Maxillofacial Surgeons
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] M3型ムスカリン受容体アゴニストの投与による唾液分泌機能の長期経時的変化についての検討 (2018)
  • Author(s): 坂本瑞樹、森山雅文、林田淳之介、大山恵子、田中昭彦、前原隆、緒方 謙一、山内昌樹、石黒乃理子、松村万由、鎮守晃、望月敬太、宗村龍祐、中村誠司
  • Organizer: 第15回日本口腔ケア学会総会・学術大会
• [Presentation] シェーグレン症候群の病態形成におけるToll様受容体を介した自然免疫の関与 (2018)
  • Author(s): 坂本 瑞樹、森山 雅文、大山 恵子、田中 昭彦、前原 隆、緒方 謙一、古川 祥子、太田 美穂、山内 昌樹、石黒 乃理子、Haque A. S. M. Rafiul、鎮守 晃、 望月 敬太、松村 万由、宗村 龍祐、林田 淳之將、中村 誠司
  • Organizer: 第72回口腔科学会学術集会