2017 Fiscal Year Annual Research Report
Functional analysis of MYEOV gene in oral squamous cell carcinoma
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15K11291
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
内田 堅一郎 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (20379986)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹縄 隆徳 山口大学, 医学部, 特別医学研究員 (30711270) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 癌 / 遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
口腔扁平上皮癌では、比較的狭い染色体領域の著しいコピー数増加である、増幅と呼ばれる染色体構造異常が11番染色体の長腕に生じる。われわれは、同領域のなかで、MYEOV遺伝子が口腔扁平上皮癌で高発現していることを発見した。MYEOV遺伝子の増幅は他の癌種でも報告されているがその役割は不明である。本研究ではMYEOV遺伝子の発現抑制の影響や相互影響する分子を同定し、MYEOV遺伝子の口腔がんの発生進展過程における役割を明らかにするために行った。MYEOV遺伝子を高発現している口腔扁平上皮癌由来細胞株である、Ca9-22細胞およびHSC4細胞を研究に供した。これらの細胞は、正常角化上皮組織由来細胞や口腔上皮異形成症由来細胞よりmRNAレベルで100倍程度MYEOV遺伝子を高発現しており、Western BlottingでもMYEOVの発現を確認している。これらの細胞に対して1nMのMYEOV遺伝子に対するSi RNAを導入すると導入後約24から72時間の間mRNAレベルで約90%のMYEOV遺伝子の発現低下と細胞増殖能の低下を認めた。同条件下でRNAシークエンシングを施行するために、RNAをTorizol Column方で抽出した。抽出したRNAの質がシークエンシング適しているか、Agilent Bioanalyzer、Qubit Fuluorocent meter, PCR法でクオリティーチェックした。RNAをOligo dT精製法を用いて精製し、HiSeq2500で、2×125のdepthでRNAシークエンシングを施行した。Ca9-22細胞にて、MYEOV遺伝子の発現抑制が多くの遺伝子の発現を抑制していたため、Real time PCR法を用いて検討した。最終的にERO1LB遺伝子とKRT6A遺伝子がMYEOV遺伝子のknock downの影響を受けて発現が減少していた。
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Research Products
(2 results)
