2017 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of the structural change-related factor in the bone microenvironment
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15K11332
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
高岡 一樹 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (60373122)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浦出 雅裕 兵庫医科大学, 医学部, 特別招聘教授 (70104883)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 骨微小環境 / 破骨前駆細胞 / TGF-β |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では，破骨前駆細胞が骨微小環境内で遊走，定着し分化する過程での細胞運動能に関するTGF-βおよびRANKLの影響を検討した．【方法】細胞はマクロファージ系破骨前駆細胞RAW264.7細胞(以下RAW細胞)を，薬剤はTGF-β1，SB431542（TGF-β1型受容体キナーゼ活性阻害剤）およびRANKLを使用した．RAW細胞を各種薬剤によって処理し，破骨細胞様細胞への分化を確認した．また，各種薬剤を24時間および72時間作用させたRAW細胞の細胞運動能の変化をmigration assayで検討し，RhoA，Rac1，Cdc42タンパク発現の変化をウエスタンブロット法にて検討した．さらに，各種薬剤を24時間および72時間作用させたRAW細胞の細胞接着能の変化をadhesion assayで検討した．【結果】破骨細胞様細胞への分化傾向はTGF-β1+ RANKL処理が最も高く，SB431542処理により分化は抑制された．24時間作用後のmigration assayでは，TGF-β1処理で細胞運動能が亢進し，SB431542処理により抑制されたが，72時間作用後ではTGF-β1処理で細胞運動能が低下し，SB431542処理により亢進した．また，24時間作用後では，TGF-β1処理によりRhoA，Rac1タンパクの発現は上昇したが，72時間作用後ではTGF-β1処理群のRhoA，Rac1，Cdc42タンパクの発現は減少した．24時間作用後のadhesion assayでは，TGF-β1作用群は接着能が低下し，その傾向はRAKLを併用作用させても同様であった．72時間作用後では，TGF-β1作用群の接着能の低下は回復傾向を示した．
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