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2017 Fiscal Year Annual Research Report

Application of modificomic technologies to discover and identify biomarkers for periodontal diseases

Research Project

Project/Area Number 15K11379
Research InstitutionChiba University

Principal Investigator

土田 祥央  千葉大学, 医学部附属病院, 特任助教 (90410422)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 佐藤 守  千葉大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (20401002)
Project Period (FY) 2015-04-01 – 2018-03-31
Keywords歯学 / 歯周病学 / プロテオミクス / モディフィコミクス / 質量分析計
Outline of Annual Research Achievements

プロテオーム解析技術の発展により、歯周疾患のバイオマーカーの開発が盛んに行われている。発現プロテオーム解析を駆使して歯周 疾患のバイオマーカー探索を続けてきた。しかし、大部分のタンパク質が何らかの翻訳後修飾を受けて初めてその本来の機能を獲得することを考慮すると、従来の発現プロテオミクスに頼る手法では限界がある。従ってタンパク質の翻訳後修飾にも注目する必要があった。
本研究ではモディフィコミクス(翻訳後修飾を特異的に検出する技術)を発展させ、歯周疾患に起こりうる代表的な翻訳後修飾であ る糖鎖修飾および最も広く研究されているリン酸化とユビキチン化にも焦点をあてて、歯周疾患における翻訳後修飾を網羅的探索により捉え、歯周疾患 の早期診断および再発予測治療効果判定等に応用することを目的とした。歯周疾患マーカー候補N型糖タンパク質・ペプチドのバリディーションおよび歯周疾患特異的リン酸化ペプチドアレイの作 製と多検体でのバリディーションを行った。免疫沈降とSDS-PAGE によりGCF中のユビキチン化タンパクのバンドを多数検出し、最終年度では質量分析技術とウエスタンブロットによりユビキチン化タンパク質をGCF中から検出した。従って、これまで網羅的な探索が行われてこなかった歯周疾患のユビキチン化を最新の質量分析技術により検出し、診断マーカーの可能性を追及することが可能となった。しかし、 歯周疾患特異的リン酸化ペプチドでのアレイ作製まで至らなかったため、実現化に向けて今後も検討を重ねる。

  • Research Products

    (8 results)

All 2018 2017

All Journal Article (4 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results,  Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 4 results) Presentation (4 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] An improved in-house lysis-filtration protocol for bacterial identification from positive blood culture bottles with high identification rates by MALDI-TOF MS.2018

    • Author(s)
      Tsuchida S, Murata S, Miyabe A, Satoh M, Takiwaki M, Matsushita K, Nomura F.
    • Journal Title

      J Microbiol Methods

      Volume: 印刷中 Pages: 印刷中

    • DOI

      10.1016/j.mimet.2018.03.014.

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Capsular serotyping of Haemophilus influenzae by using matrix-associated laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry.2018

    • Author(s)
      Takeuchi N, Segawa S, Ishiwada N, Ohkusu M, Tsuchida S, Satoh M, Matsushita K, Nomura F.
    • Journal Title

      J Infect Chemother

      Volume: 印刷中 Pages: 印刷中

    • DOI

      10.1016/j.jiac.2018.02.007.

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Assessment by Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry of the Effects of Preanalytical Variables on Serum Peptidome Profiles Following Long-Term Sample Storage.2018

    • Author(s)
      Tsuchida S, Satoh M, Umemura H, Sogawa K, Takiwaki M, Ishige T, Miyabayashi Y, Iwasawa Y, Kobayashi S, Beppu M, Nishimura M, Kodera Y, Matsushita K, Nomura F
    • Journal Title

      Proteomics Clin Appl

      Volume: 印刷中 Pages: 印刷中

    • DOI

      10.1002/prca.201700047.

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Ubiquitination in Periodontal Disease: A Review.2017

    • Author(s)
      Tsuchida S, Satoh M, Takiwaki M, Nomura F
    • Journal Title

      Int J Mol Sci

      Volume: 18(7) Pages: pii: E1476.

    • DOI

      10.3390/ijms18071476.

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] 血液培養陽性検体よりの複数菌由来の核酸検出2018

    • Author(s)
      西村 基, 村田 正太, 姚 躍, 土田 祥央, 田中 知明, 松下 一之
    • Organizer
      第29回日本臨床微生物学会総会
  • [Presentation] 37mmクオリティモニターを用いたMALDI-TOF MSによる血液培養ボトルからの迅速細菌同定の検討2017

    • Author(s)
      土田 祥央, 宮部 安規子, 村田 正太, 齊藤 知子, 瀬川 俊介, 佐海 知子, 上原 麻美, 中村 恵海, 渡邊 正治, 曽川 一幸, 滝脇 正貴, 西村 基, 佐藤 守, 松下 一之, 野村 文夫
    • Organizer
      第42回日本医用マススペクトル学会
  • [Presentation] 保存された臨床検体(血清)の質量分析による劣化の評価 The effects of preanalytical variables on serum peptidome profiles following long-term storage2017

    • Author(s)
      土田 祥央,佐藤 守,梅村 啓史,曽川 一幸,滝脇 正貴,西村 基,小寺 義男,松下 一之,野村 文夫
    • Organizer
      日本プロテオーム学会 2017 年大会(JHUPO 第 15 回大会)
  • [Presentation] 保存された臨床検体(血清)の質量分析による劣化の評価2017

    • Author(s)
      土田祥央
    • Organizer
      第3回クリニカルバイオバンク研究会
    • Invited

URL: 

Published: 2018-12-17  

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