2015 Fiscal Year Research-status Report
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15K14314
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
松尾 直毅 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (10508956)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 記憶 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究代表者らが世界に先駆けて開発した、immediate-ealy geneの一つであるc-fos遺伝子のプロモーターとテトラサイクリン発現誘導系を組み合わせた独自の遺伝子改変マウスのシステムを利用して、チャネルロドプシン（ChR2）もしくはDREADD (Designer Receptors Exclusively Activated by Designer Drug)というメカニズムの異なる２種類の神経活動操作が可能な遺伝子を発現するダブルトランスジェニックマウスをそれぞれ作製した。これらのトランスジェニックマウスを利用することによって、学習時に活動した脳内の一部の神経細胞集団（記憶エングラム細胞）を標識して、さらにそれらの細胞集団選択的な人為的な活動操作を行うことが出来る。本年度はこれらの遺伝子改変マウスを用いて、記憶痕跡細胞の人為的再活性化により記憶が想起される最適条件（脳定位装置による正確な照射位置、Dox濃度と除去期間、光照射装置による適切な光の強さ・周波数、CNOの至適濃度など）の確立を試みた。c-fos-tTA x tetO-ChR2ダブルトランスジェニックマウスに関しては、Dox存在下においても十分なChR2の発現が検出され、Dox濃度を検討することにより若干の改善は認められたが、発現漏れを抑えることができなかったため、このマウスを今後使用することは断念した。代わりに、アデノ随伴ウイルスを用いた実験系の条件検討を行った。c-fos-tTA x tetO-hM3Dqダブルトランスジェニックマウスに関しては、いくつかの改善すべき点はあるものの、研究に使える条件の目処を立てることが出来た。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
予想外に遺伝子改変マウスでの外来遺伝子の発現の漏れが多いため、その至適条件の検討に時間が割かれているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
まずは、記憶痕跡細胞の再活動により記憶が人為的に想起される最適条件の確立を早急に行い、本研究の目的である、記憶を担う神経アンサンブルの領域間相互作用の解析を行う計画である。
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