2016 Fiscal Year Annual Research Report
Real time three dimensional imaging of chemiluminescence with Fresnel incoherent correlation holography
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15K14487
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
永井 健治 大阪大学, 産業科学研究所, 教授 (20311350)
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2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 化学発光 / ホログラフィー / 超解像顕微鏡 / イメージング / ３次元 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題は、発光試料から射出する光のみで、操作することなく三次元画像を得ることが可能なデジタルホログラフィーを構築し、高光度化学発光タンパク質を光プローブとして用いることで、高速・三次元・高空間分解ライブイメージ画像を取得可能な新規顕微鏡システムを開発することを目的としている。
これまでに連携研究者のBrooker博士が開発したFINCH光学系(BrookerらOpt. Lett.2013)において化学発光イメージングが可能かどうかについて検討を行い、高光度化学発光タンパク質Nano-lanternを発現するHeLa細胞を用いて化学発光によるデジタルホログラフィー観察が可能であることを実証した。さらにFINCH光学系の空間分解能を向上させるための補償光学系の挿入場所の光学デザインも行った。今年度は、そのデザインに基づいて顕微鏡結像系の試作機構築を行い、補償光学系による波面収差補正の評価を行った。無限補正の10倍の対物レンズを使った顕微鏡光学系に、ガイドスターとして635nmのダイオードレーザー、波面収差を検出するためのShack-Hartmann波面センサー、そして空間光変調器を組み込んだ。Shack-Hartmann波面センサーで計測した波面のずれを空間光変調器にフィードバック・収差補正することで、結像特性が改善した画像の取得に成功した。現在、FINCH法とその補償光学系を組みあわせた光学系を設計、構築中である。
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