2017 Fiscal Year Annual Research Report
Construction of a transposon insertion mutants library in Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis for development of a novel strategy to treat mastitis
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15K14852
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
米山 裕 東北大学, 農学研究科, 准教授 (10220774)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
野地 智法 東北大学, 農学研究科, 准教授 (10708001)
秦 英司 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, その他, 研究員 (50355153)
林 智人 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究部門, ユニット長 (90297630)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 乳房炎 / 病原微生物 / 黄色ブドウ球菌 / トランスポゾン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
畜産業界において乳房炎等秘乳器疾患は最も発生頻度の高い疾患でその経済的損失は甚大であり我が国における乳房炎の損失は年間800億円にも達する。乳房炎起因の中でも黄色ブドウ球は抗生物質による治療後も再発を繰り返し、難治化する傾向にあることから、本菌による乳房炎の克服は獣医畜産領域で喫緊の課題である。黄色ブドウ球菌、中でもメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）は、ヒト感染症の主要起因菌であり各種抗生物質に多剤耐性を示すために脅威となることから、ヒト感染症に由来するMRSAの病原因子に関する研究がこれまで多くなされてきた。しかし、ウシ乳房炎起因菌としての黄色ブドウ球菌の病原因子に関する研究はヒトのそれに大きく遅れている。このような背景にあり、ウシ乳房炎の起因菌として最も問題となる黄色ブドウ球菌に対する新たな予防・治療戦略を構築するためには、これまで欠けていたウシ乳房炎由来の黄色ブドウ球菌の基礎微生物学的研究が必要である。そこで、本研究において、ウシ由来黄色ブドウ球菌の病原因子を同定するために、ウシ乳房炎に由来するSA5株に、トランスポゾンbursa aurealisを有するプラスミドpBursaとトランスポゾン転移酵素遺伝子をもつpFA545を形質転換した。次いで、トランスポゾン挿入変異ライブラリーを構築するための条件検討を行い、頻度は低いもののトランスポゾンbursa aurealisがウシ乳房炎由来黄色ブドウ球菌ゲノムに転移していることを検証することができた。また、ヒト由来黄色ブドウ球菌を対象とした先行研究から本菌の病原因子として重要な各種タンパク質を細胞表層に呈示するsortaseに注目し、ウシ由来SA5株のsortaseを相同組み換えで破壊したアイソジェニック変異株の構築に成功した。
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