2016 Fiscal Year Annual Research Report
The investigation for the establishment of organ processing available for transplantation using 3-dimensional scaffold derived from natural liver
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15K15065
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
安近 健太郎 京都大学, 医学研究科, 講師 (00378895)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上本 伸二 京都大学, 医学研究科, 教授 (40252449)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 再生医学 / 人工肝臓 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
初代培養したマウス胎仔肝前駆細胞と成体肝細胞を用いて脱細胞化肝臓（3D scaffold）への再細胞化プロトコールを種々の条件下に検証し、従来主流であった経門脈的再細胞化より経胆管的再細胞化において優位に高い生着効率（20.1％ vs 81.3%）が得られ、かつ生着した細胞のviabilityも高いことを確認した。その上で再細胞化後の低速循環培養プロトコール（3時間静置に引き続き細胞培養液を0.5ml/hの速度で７日間還流培養）を確立し、再細胞化された胎仔肝前駆細胞が増殖活性を保ちつつ、脱細胞化肝臓の中で肝細胞へ成熟化することをアルブミンおよび尿素合成能で確認したほか、胆管細胞への分化も組織学的に確認できたことから、再細胞化肝臓作製における細胞源として胎仔肝前駆細胞の有用性を示した。上記結果を踏まえて、肝細胞は経胆管的に再細胞化するとともに、ラット肝臓から採取・初代培養した類洞内皮細胞（LSEC）を経門脈的に再細胞化することで、より生理的な臓器形成を試みた。再細胞化されたLSECは生着して特異的表面抗原（SE-1）を発現することが免疫組織学的に確認されるとともに、特異的構造であるfenestration形成が電子顕微鏡的に確認された。さらに、経胆管的に肝細胞のみを再細胞化した肝臓と、肝細胞に加えて経門脈的にLSECを再細胞化した肝臓に血液還流すると、LSECを再細胞化させた肝臓において血栓形成が抑制されることをintegrinαIIb発現により定量的に評価しただけでなく、肝細胞障害が軽減されることがTUNEL染色により確認され、移植グラフトとしての可能性を示した。一方、薬剤により誘導したラット硬変肝の脱細胞化に成功し、これに肝癌細胞株を再細胞化することにより肝硬変肝臓の3D scaffoldが肝癌細胞を上皮間葉転換させ、増殖活性を促進させることを示した。。
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Research Products
(4 results)
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[Journal Article] Efficient recellularisation of decellularised whole-liver grafts using biliary tree and foetal hepatocytes2016
Author(s)
Satoshi Ogiso, Kentaro Yasuchika, Ken Fukumitsu, Takamichi Ishii, Hidenobu Kojima, Yuya Miyauchi, Ryoya Yamaoka, Junji Komori, Hokahiro Katayama, Takayuki Kawai, Elena Yukie Yoshitoshi, Sadahiko Kita, Katsutaro Yasuda, Shinji Uemoto
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 21
Pages: 1-10
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] Liver sinusoidal endothelial cell as a cell source to fabricate vasculature and maintain performance of hepatocyte in engineered liver graft2016
Author(s)
Hidenobu Kojima, Kentaro Yasuchika, Ken Fukumitsu, Satoshi Ogiso, Yuya Miyauchi, Ryoya Yamaoka, Takayuki Kawai, Hokahiro Katayama, Elena Y Yoshitoshi, Sadahiko Kita, Katsutaro Yasuda, Naoya Sasaki, Takamichi Ishii, Junji Komori, Shinji Uemoto
Organizer
he Liver Meeting 2016. American Association for the Study of Liver Disease
Place of Presentation
Boston, MA, USA
Year and Date
2016-11-11 – 2016-11-15
Int'l Joint Research
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[Presentation] Optimizing recellularization of decellularized whole-liver graft: from which route and with which cell?2016
Author(s)
Satoshi Ogiso, Kentaro Yasuchika, Ken Fukumitsu, Takamichi Ishii, Hidenobu Kojima, Yuya Miyauchi, Ryoya Yamaoka, Hokahiro Katayama, Takayuki Kawai, Sadahiko Kita, Shinji Uemoto
Organizer
The American College of Surgeons 102nd Clinical Congress
Place of Presentation
Washington DC, USA
Year and Date
2016-10-19
Int'l Joint Research
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[Presentation] Biliary tree as a window for repopulation of the decellularized liver scaffold.2016
Author(s)
Satoshi Ogiso, Kentaro Yasuchika, Ken Fukumitsu, Takamichi Ishii, Hidenobu Kojima, Yuya Miyauchi, Ryoya Yamaoka, Hokahiro Katayama, Takayuki Kawai, Elena Yukie Yoshitoshi, Sadahiko Kita, Katsutaro Yasuda, Shinji Uemoto
Organizer
26th International congress of the transplantation society
Place of Presentation
Hong Kong
Year and Date
2016-08-20
Int'l Joint Research
