2015 Fiscal Year Research-status Report
伸長リピート特異的転写抑制によるリピート病の根源的治療開発
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15K15339
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
中森 雅之 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60630233)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | トリプレットリピート / 筋強直性ジストロフィー / ハンチントン病 / 脊髄小脳萎縮症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
CAGやCTGといった塩基繰り返し配列（リピート）の異常伸長により引き起こされるリピート病では、異常伸長DNAから転写されたmRNA（筋強直性ジストロフィーなど）や、翻訳された蛋白（ハンチントン病など）が毒性を示すことが知られている。これまでリピート病では、個別の異常mRNAや蛋白をターゲットとする治療研究がすすめられてきたが、いまだ十分な効果は得られていない。本研究の目的は、リピート病全般においてより高い治療効果を達成するため、異常伸長アリルからのmRNA転写を特異的に抑制する化合物を探索し、細胞・動物モデルでその効果を検証して、リピート病の病因を根源から断つ治療法を確立することにある。本年度は、ルシフェラーゼcDNAの5末端非翻訳領域に異常リピートを挿入したC2C12細胞モデルを用い、伸長リピートの転写を抑制する低分子化合物を同定するためのハイスループットスクリーニングシステムを確立した。本システムを用いて、既存薬・天然化合物ライブラリより約60のヒット化合物を同定した。筋強直性ジストロフィーモデル細胞を用いた二次スクリーニングにより、CTGリピート特異的転写抑制効果が特に高い2つの化合物を同定した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
ハイスループットスクリーニングシステムの確立にあたり、非特異的に転写を抑制する化合物が多くヒットする懸念があったが、細胞のviabilityをコントロールとすることにより、リピート特異的転写抑制効果をもつ化合物の同定に成功した。
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| Strategy for Future Research Activity |
一次・二次スクリーニングにより同定された化合物の効果を、疾患特異的iPS細胞や動物モデルで検証する。またCAGやCTGリピートだけでなく、筋萎縮性側索硬化症の原因のひとつである伸長GGGGCCリピートの転写を抑制する化合物のスクリーニングにも着手する。
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| Causes of Carryover |
平成２７年度の研究は、すでに保有する研究機器、試薬・消耗品、無料の大阪大学内低分子化合物ライブラリ-を用いたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成２８年度以降は、iPS細胞や動物モデルなどを使用し、また有償の低分子化合物ライブラリ-を使用するため、次年度使用額を充当する。
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