2015 Fiscal Year Research-status Report
KITのSH3ドメイン機能獲得変異に着目した悪性黒色腫の新規治療標的分子の同定
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15K15414
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
杉浦 一充 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (70335032)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 悪性黒色腫 / ｃ－ＫＩＴ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は2つある。目的１は、KIT変異による悪性黒色腫の新規治療標的分子を同定すること。はじめに3種（後述）のc-kitを恒常発現する無色素性メラノーマ細胞株を用いてプロテオーム解析で網羅的に比較解析をして標的分子を絞り込む。次にヒトの悪性黒色腫組織の免疫組織化学をして標的分子を同定する。申請者らは稀な遺伝性の全身性色素斑の病因遺伝子同定の研究で、臨床的に色素産生は来すが悪性腫瘍化は来さない、全く新しいタイプのKIT変異（SH3ドメインを創出する変異）を発見した。3種のc-kitとは、１つはこの新しいタイプの変異、1つは悪性腫瘍化を来す変異、そして野生型である。標的分子が同定されれば、KIT変異による悪性黒色腫の新規治療法の開発へ繋がっていく。目的2は、発見したKIT変異が本当にSH3ドメインを創出する変異か否かについて結合するタンパク質の同定とともに解明すること。悪性腫瘍化変異（c-kit p.Lys642Gluとc-kit p.Asp820Tyr）、非悪性腫瘍化変異(c-kit p.Ala829Pro)、c-kit野生型を恒常的に発現する無色素性メラノーマ由来細胞株を作成し、以下の実験1、2、3で使用した。１．プロテオーム解析でc-kit p.Ala829Proが細胞内領域にSH3ドメインを創出する変異であることを特異的に結合するタンパク質の同定とともに解明した。2．c-kit恒常発現株それぞれの増殖能をBrdU ELISAで比較検討した。3．悪性腫瘍化変異と非悪性腫瘍化変異と野生型の恒常発現株の抽出液のタンパク質発現をプロテオーム解析で比較検討し、悪性腫瘍化変異恒常発現株に特異的に発現するタンパク質群を抽出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
実験の実施を予定していた研究協力者の大学院生3名が、子供（幼少時）の慢性かつ手厚い保護をすべき疾病、夫の留学に伴い渡米、一身上の都合で退学などの理由により、実験に大幅な遅れが生じた。
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| Strategy for Future Research Activity |
１．50例の悪性黒色腫のパラファイン切片からDNAを抽出し、KIT変異を解析する。2．KIT変異による悪性黒色腫組織において、実験3のプロテオーム解析で抽出したタンパク質群について免疫組織化学を実施する。最後に、2で発現の認められた分子をKIT変異による悪性黒色腫の新規治療標的分子として提言する。治療標的分子は悪性黒色腫の免疫組織化学での新規診断マーカーとしても期待される。
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| Causes of Carryover |
実験の実施を予定していた研究協力者の大学院生3名が、子供（幼少時）の慢性かつ手厚い保護をすべき疾病、夫の留学に伴い渡米、一身上の都合で退学などの理由により、実験に大幅な遅れが生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
DNAを抽出試薬、PCR試薬、免疫組織化学試薬などに使用する。
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[Journal Article] Dowling-Degos disease with mutations in POFUT1 is clinicopathologically distinct from reticulate acropigmentation of Kitamura.2015
Author(s)
Kono M, Suganuma M, Takama H, Zarzoso I, Saritha M, Bodet D, Aboobacker S, Kaliaperumal K, Suzuki T, Tomita Y, Sugiura K, Akiyama M.
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Journal Title
Br J Dermatol
Volume: 173
Pages: 584-6.
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Essential role of the cytochrome P450 CYP4F22 in the production of acylceramide, the key lipid for skin permeability barrier formation.2015
Author(s)
Ohno Y, Nakamichi S, Ohkuni A, Kamiyama N, Naoe A, Tsujimura H, Yokose U, Sugiura K, Ishikawa J, Akiyama M, Kihara A.
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Journal Title
Proc Natl Acad Sci U S A
Volume: 112
Pages: 7707-12.
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Diversity of humoral responses to thecentromere proteins among HCV-relatedchronic liver disease, PBC and AIH patients.2015
Author(s)
Himoto T, Tanaka N, Saito A, Muro Y, Sugiura K, Tani J, Miyoshi H, Morishita A, Yoneyama H, Haba R, Masaki T.
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Journal Title
Clin Res Hepatol Gastroenterol
Volume: 39
Pages: 222-9.
DOI
Peer Reviewed
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