angiogenic therapy for cerebral infarction with anti^sense homology derived peptide targeting angiogenic factor

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K15523
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 高野 晋吾 筑波大学, 附属病院, 病院講師 (50292553)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 上羽 哲也 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 教授 (00314203) ; 伊藤 嘉朗 筑波大学, 附属病院, 病院講師 (90733014)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: FGF受容体 / アンチセンスホモロジーボックス / 内皮細胞 / 脳梗塞 / 血管新生

Outline of Annual Research Achievements

FGFRに対するAHBペプチドの生理活性の脳梗塞への応用研究を継続した。今年度に計画していたin vivoの実験を含めて以下の３つの実験は、準備だけで結果が出せなかった。１）FGFR AHBペプチドのin vivo血管新生促進効果、２）FGF2徐放剤留置脳梗塞モデルにおけるペプチドの脳梗塞改善効果、３）VEGF受容体に対するAHB由来ペプチドの合成。In vivo実験は今後の成果に期待する。
これまでの結果の整理を行い、以下の結論が出ている。１）FGFRに対する作成した14個のAHBペプチドのうち、FGFR細胞外ドメイン対するAHBペプチド（No.4）に最も強い内皮細胞増殖促進効果がみられた。２）AHBペプチド(No.4)の内皮細胞増殖促進効果は、ペプチド内のアミノ酸配列を変えた変換ペプチドでは消失し、FGF非存在下では見られず、siRNAによるFGFRノックダウン内皮細胞で消失したことから、FGF特異的な現象と考えられた。３）AHBペプチド投与により、内皮細胞のリン酸化蛋白（Akt, MAPK, PKC）の発現増加を認め、ペプチドには内皮細胞に結合し、内皮細胞内でFGF2シグナルが動いたことが明らかにされた。４）ただし、AHBペプチドには内皮細胞の管腔形成に影響を及ぼさなかった５）AHBペプチドと内皮細胞の結合は、Biacore assayで生理学的に示すことはできず、アッセイの方法に検討を残した。６）FGFRに対するAHBペプチドは内皮細胞増殖促進作用を持つ。