2016 Fiscal Year Annual Research Report
Getting genetic information from IVF media for noninvasive prenatal genetic screening
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15K15594
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
生水 真紀夫 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (30226302)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 産婦人科学 / 産科学 / 出生前診断 / 体外受精胚移植 / 流産 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
胚盤胞の非侵襲的着床前遺伝子スクリーニングNIPGS法の開発を目的として、前年度の培地蛋白情報による診断に続き、今年度は胚盤胞培地中の核酸情報による診断の可能性を検討した。ヒト体外受精胚の培養済み培地からRNAを抽出し逆転写後にPCRによる増幅を行った。２１番染色体特異配列などを含め複数のプライマーセットで検出を行ったところ、増幅シグナルが検出されたが、検討の結果その多くが環境由来DNAの混入によると推定された。したがって、体外受精胚培養に用いられた培地中に胚由来DNAが存在するがその量は少ないこと、また環境由来DNAの混入があることが示された。したがって、臨床応用に向けて検出感度の向上とともにコンタミネーションへの対策が必要と考えられた。次に、培地中miRNAの検出と診断応用への可能性を検討した。その結果、培地中に胚由来miR22が存在していることが示され、miRNAはNIPGSの候補であることを確認した。次に、培地中のミトコンドリアDNAのNIPGSへの応用の可能性について検討した。研究に同意の得られた廃棄胚を培養し、発育のみられた胚培地からDNAを増幅しNGSを行った。その結果、すべての胚でミトコンドリアDNA Dループ可変領域の配列を得ることができた。これを胚のゲノムDNAのNGS結果と照合したところ、11検体中7例で培地DNAと胚DNAが一致、3例でminor allele drop outが示唆され,１例については30％程度のヘテロプラスミーの存在が疑われる結果となった。これらの結果から、培養胚の一部にヘテロプラスミー胚が存在している可能性があること、培地によるヘテロプラスミー診断の可能性があることが示唆された。しかし、ヘテロプラスミー頻度が低い場合には培地検体ではヘテロプラスミーの検出ができない可能性があることが示された。
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[Journal Article] Ovarian nongestational choriocarcinoma and associated adenocarcinoma with the same germ cell origin determined by a molecular genetic approach: A case report.2016
Author(s)
Koyanagi T, Fujiwara H, Usui H, Ariga H, Machida S, Takei Y, Saga Y, Shozu M, Fukushima N, Niki T, Matsubara S, Suzuki M.
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Journal Title
Pathol Int.
Volume: 66
Pages: 529-534
DOI
Peer Reviewed
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