Lineage tracingによる脂肪移植片生着機構の解明

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K15654
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 宇田 宏一 自治医科大学, 医学部, 准教授 (20337306)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 須永 中 自治医科大学, 医学部, 助教 (00406117)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 脂肪由来幹細胞 / 系譜追跡

Outline of Annual Research Achievements

Prx1発現細胞特異的にCre recombinaseを発現するPrx1Creマウスと、Cre recombinaseを発現した細胞において赤色蛍光色素tdTomatoを発現するRosa26-LSL-tdTomatoマウス（Ai14マウス）をJackson laboratoryより購入し、それぞれを繁殖させた。繁殖によって得られたPrx1Creマウスの雄とAi14マウスの雌を交配することによって、Prx1発現細胞に由来する細胞がtdTomatoを発現するPrx1Cre;Ai14マウスを作製した。Prx1Cre;Ai14マウスの鼠径部より脂肪組織を摘出し、コラゲナーゼ処理をすることによってAdipose-derived stem/stromal cellsを抽出した。このPrx1Cre;Ai14マウス由来のAdipose-derived stem/stromal cellsに対して、CD34,CD31による免疫蛍光染色を行い、共焦点レーザー顕微鏡にて観察した。その結果、CD34陽性CD31陰性の細胞はほとんどがtdTomato陽性であった。これらより、Prx1Cre;Ai14マウスの鼠径部脂肪組織内においてはtdTomato陽性細胞がAdipose-derived stem/stromal cellsであり、移植実験においてtdTomatoによるAdipose-derived stem/stromal cellsの系譜追跡が可能であることが示された。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

遺伝子改変マウスの繁殖において、Prx1Creマウス、Ai14マウスともに仔を産まないペアが散見され、研究に必要な数の遺伝子改変マウスを用意するのに時間を要したため。

Strategy for Future Research Activity

Prx1Cre;Ai14マウスより抽出したtdTomato陽性のAdipose-derived stem/stromal cellsをWildマウスに移植することによって、線維化や放射線障害の治療を行い、移植部位におけるtdTomato陽性細胞の形質・局在を解析する。